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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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稻麦a-淀粉酶（a-AMYLASE）活性DNS比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/11/4 11:19:21 阅读次数：3

稻麦a-淀粉酶（a-AMYLASE）活性DNS比色法定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

稻麦a-淀粉酶（a-AMYLASE）活性DNS比色法定量检测试剂是一种旨在使用具有还原力的黄色3,5-二硝基水杨酸与受到a-淀粉酶中性环境下水解产生的还原基团分子反应，生成强烈吸光的3-氨基-5-硝基水杨酸，即采用比色法测定其还原后峰值的升高变化，以此测定样品中a-淀粉酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种新鲜稻子和麦子组织，包括谷粒（grain）、种子（seed）等裂解萃取液样品a-淀粉酶的活性检测。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

技术背景

淀粉酶（AMYLASE）属于糖苷水解酶类（glycoside hydrolase）。淀粉酶通过水解方式，分解淀粉的α-1,4链接，释放出葡萄糖、麦芽糖（maltose）、麦芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等简单糖分子。淀粉酶分成三类：α-淀粉酶、β-淀粉酶和γ-淀粉酶。其中α淀粉酶（EC 3.2.1.1），又称为α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶（α-1,4-glucan 4-glucanohydrolase）或糖原酶（glycogenase），是钙离子依赖性钙金属蛋白酶（calcium metalloenzyme），分解淀粉为葡萄糖、麦芽糖（maltose）、麦芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等，为主要的消化酶，尤其在人体中，例如唾液和胰淀粉酶等。β淀粉酶（EC 3.2.1.2），又称为α-1,4-葡聚糖麦芽糖水解酶（1,4-α-D-glucan maltohydrolase）或糖基淀粉酶（saccharogen amylase），分解淀粉为葡萄糖等。植物、真菌、细菌等均能产生，而人体组织不含有。γ-淀粉酶（EC 3.2.1.2），又称为α-1,4-葡聚糖葡萄糖苷酶（Glucan 1,4-α-glucosidase）或溶酶体α-葡萄糖苷酶（lysosomal α-glucosidase），在酸性环境下分解淀粉为葡萄糖。淀粉是一种复杂分子，由多聚糖直链淀粉（amylose）和支链淀粉（amylopectin）构成。植物和细菌产生大多数淀粉。在淀粉酶的催化作用下，分解产生简单糖分子，作为能源储存，植物用于光合作用。植物和细菌性淀粉酶常用于工业，包括烘培食物和乳制品的制造，以及酒精和纸材的生产。基于淀粉，在中性环境下，通过α-淀粉酶的水解，释放出麦芽糖等含有游离的还原性基团（例如酮基等），进一步使用具有还原力的黄色3,5-二硝基水杨酸（3,5-Dinitrosalicylic acid；DNS）与之反应，产生红棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸（3-amino-5-nitrosalicylic acid），在分光光度仪（540nm波长）下测定，以定量分析α-淀粉酶的活性。其反应方式为：

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

裂解液（Reagent B）毫升

缓冲液（Reagent C）毫升

反应液（Reagent D）毫升

底物液A（Reagent E）毫升

底物液B（Reagent F）毫升

补充液（Reagent G）毫升

标准液（Reagent H）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；底物液B（Reagent F），避免光照，有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品制备和反应操作的容器

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

2.2毫升离心管：用于配制标准样品的容器

DOUNCE匀浆器：用于裂解组织

尼龙网（nylon mesh）：用于去除残渣

4℃（微型）台式离心机：用于样品处理

沸水装置：用于反应物孵育

比色皿：用于比色测定的容器

分光光度仪：用于比色分析

实验步骤

一、样品准备

1．准备好新鲜的稻麦组织（谷粒、种子等），并秤重以确定1克组织重量

2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管

3．（选择步骤）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次

4．移入到一个液氮冻存管

5．即刻放进液氮罐过夜

6．次日从液氮罐里取出，即刻（最快速度）碾碎组织成粉末（注意：切莫使组织冻融）

7．放进一个15毫升锥形离心管

8．加入预冷的xx毫升裂解液（Reagent B）

9．涡旋震荡5秒，充分混匀

10．即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器

11．置于冰槽里用研磨棒匀化组织（约80下）

12．准备1个小型漏斗，内衬尼龙丝或150微米的尼龙网（nylon mesh），置于15毫升锥形离心管上

13．将所有组织匀浆物移入到小型漏斗里过滤

14．（选择步骤）或者放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为1000g

15．小心移取无渣液分装到预冷的1.5毫升离心管

16．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

17．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作（注意：后续操作须在2小时内完成）

二、测定准备

1．从-70℃取出待测样品（例如稻麦组织裂解悬液样品等），置于冰槽里

2．设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长为540nm，并置零

3． 缓冲液（Reagent C）室温下均衡温度

4．测定开始前，移出xx微升底物液B（Reagent F）到新的1.5毫升离心管，一滴一滴缓慢加入xx微升底物液A（Reagent E），混匀后，置于冰槽里，标记为底物工作液（1次操作），放在暗室里备用。然后进行下列操作

三、 标准样品测定

1．准备好5个2.2毫升离心管，标记为1至5号管

2．分别加入xx毫升缓冲液（Reagent C）到1至5号管

3．移取xx毫升标准液（Reagent H）到1号管，混匀

4．小心移取xx毫升1号管稀释的标准液（Reagent H）到2号管，混匀

5．小心移取xx毫升2号管稀释的标准液（Reagent H）到3号管，混匀

6．小心移取xx毫升3号管稀释的标准液（Reagent H）到4号管，混匀

7．将1至5号管放进冰槽里备用；标准管浓度见下表

管号	缓冲液（Reagent C）	标准液（Reagent H）	标准麦芽糖浓度
1	xx毫升	xx毫升	xx毫摩尔/升
2	xx毫升	xx毫升1号管	xx毫摩尔/升
3	xx毫升	xx毫升2号管	xx毫摩尔/升
4	xx毫升	xx毫升3号管	xx毫摩尔/升
5	xx毫升	0	0

8．准备5个15毫升比色管，标记为1至5号测试管

9．分别移取xx毫升上述配制的系列标准液（Reagent H）到相应的测试管里

10．分别加入xx毫升上述配制的底物工作液

11．在沸水里孵育10分钟，避免光照

12．在室温下静置15分钟冷却，避免光照

13．分别加入xx毫升补充液（Reagent G），混匀

14．移取3毫升或1毫升到相应的比色皿

15．即刻放进分光光度仪检测：获得吸光读数

16．构建标准曲线：纵座标（Y轴）为吸光单位；横座标（X轴）为标准麦芽糖浓度（毫摩尔/升）

四、样品和背景测定

1．移取xx微升缓冲液（Reagent C）到新的15毫升锥形离心管

2．加入xx微升待测样品（100微克裂解萃取蛋白）或补充液（Reagent G）

3． 25℃温度下，孵育3分钟

4．加入xx微升反应液（Reagent D），混匀

5． 25℃温度下，孵育3分钟

6．分别加入xx毫升上述配制的底物工作液

7．在沸水里孵育10分钟，避免光照

8．在室温下静置15分钟冷却，避免光照

9．分别加入xx毫升补充液（Reagent G），混匀

10．移取3毫升或1毫升到相应的比色皿

11．即刻放进分光光度仪检测：获得吸光读数

12．实际样品吸光读数：样品吸光读数－背景吸光读数

13．根据标准曲线获得样品对应麦芽糖浓度

14．测算样品酶活性：

注意事项

1．本产品为25次操作，包括标准样品测定

2．操作时，须戴手套

3．底物工作液注意避光

4．样品检测前，须溶解和澄清

5．比色测定后，比色皿须清洗彻底

6．测定值由低到高变化，表明有酶活性

7．建议待测样本蛋白浓度为100微克/100微升；如果样本酶活性过低，则可以增加样本量（本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒G&VS30030.1）

8．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度

9． a-淀粉酶活性单位浓度定义：在25℃室温下，pH 6.9的情况下，每单位酶在单位时间内（每分钟）释放1微摩尔的麦芽糖分子

10．本公司提供系列淀粉酶学分析技术产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测准确

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组份订购信息

编号名称规格

G&VS19019.3 稻麦a-淀粉酶活性DNS比色法定量检测试剂盒 20次

G&VS19019.3A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS19019.3B 裂解液（Reagent B）毫升

G&VS19019.3C 缓冲液（Reagent C）毫升

G&VS19019.3D 反应液（Reagent D）毫升

G&VS19019.3E 底物液A（Reagent E）毫升

G&VS19019.3F 底物液B（Reagent F）毫升

G&VS19019.3G 补充液（Reagent G）毫升

G&VS19019.3H 标准液（Reagent H）毫升

G&VS30030.1 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒 100次

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS19019.1	大麦β-淀粉酶活性DNS比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19019.2	麦芽粉β-淀粉酶活性DNS比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19019.3	稻麦α淀粉酶活性DNS比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19019.4	土壤α淀粉酶活性DNS比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19019.5	大麦β-淀粉酶活性PNPG5酶偶联比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19019.6	麦芽粉β-淀粉酶活性PNPG5酶偶联比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19019.7	稻麦α淀粉酶活性EPS-G7酶偶联比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19019.8	土壤α淀粉酶活性EPS-G7酶偶联比色法定量检测试剂盒	20次