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发布时间:2026/11/4 11:22:17 阅读次数:3
燕麦β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
燕麦β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂是一种旨在通过化学方法萃取处理,进而使用生物酶水解葡聚糖分子为单体还原糖,然后运用葡萄糖氧化酶和过氧化物酶耦联反应系统,测定样品中的葡萄糖氧化后产物,转化为有色醌亚胺,即采用比色法测算样品中葡聚糖含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于燕麦萃取液样品中葡聚糖的检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
β-D-葡聚糖(β-D-glucan)是一种葡萄糖单体通过β-1,3或β-1,4主链和β-1,6侧链上的糖苷键(glycosidic bond)链接而成的多聚体葡萄糖分子,普遍存在于植物中纤维素(cellulose)、谷粒外皮、以及藻类、真菌、酵母、蘑菇或细菌的胞壁等。其中β-1,3-D葡聚糖更为常见,具有生物活性和药物特性,包括免疫刺激、抗炎、抗菌、抗传染、抗癌、降低胆固醇、放射线的保护及伤口愈合等活性。β-D-葡聚糖的测定包括苯酚-硫酸法、刚果红法、苯胺蓝法和酶连续反应法等。基于葡聚糖样品在化学方法萃取后,首先在葡聚糖酶(lichenase)催化下,产生还原性葡萄糖,进一步使用葡萄糖苷酶(glucosidase)的完全水解,产生还原性单体葡萄糖, 然后通过葡萄糖氧化酶和过氧化物酶耦联反应(glucose oxidase/peroxidase;GOPOD)系统,即葡萄糖在葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)作用下,产生葡萄糖酸(gluconate)和过氧化氢,继而与4-氨基安替比林(4-aminoantipyrine; 4-AA)反应,过氧化物酶(peroxidase)帮助生成红色的有色醌亚胺(quinoneimine dye),在分光光度仪(510nm 波长)下,来定量分析还原性糖浓度,间接分析样品中葡聚糖的含量,其反应方式为:
产品内容
萃取液(Reagent A) 毫升
平衡液(Reagent B) 毫升
酶解液A(Reagent C) 毫升
酶解液B(Reagent D) 毫升
缓冲液(Reagent E) 毫升
底物液(Reagent F) 毫升
反应液(Reagent G) 微升
阴性液(Reagent H) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存酶解液A(Reagent C)、酶解液B(Reagent D)、底物液(Reagent F)和反应液(Reagent G)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,底物液(Reagent F)避免光照,有效保证6月
用户自备
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
恒温水槽:用于反应孵育
台式离心机:用于样品操作
比色皿或酶标板:用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪:用于比色分析
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化,底物液(Reagent F)避免光照。同时设定好分光光度仪:波长510nm,并置零。然后进行下列操作。
一、 样品准备
1. 秤取500毫克燕麦样品到5毫升冻存管
2. 移入一个液氮冻存管
3. 即刻放进液氮罐过夜
4. 次日从液氮罐里取出,即刻(最快速度)碾碎成粉末(注意:切莫使组织冻融)
5. 放进一个15毫升锥形离心管
6. 加入xx毫升萃取液(Reagent A)
7. 涡旋震荡,混匀沉淀颗粒群
8. 加入xx毫升平衡液(Reagent B)
9. 涡旋震荡20秒
10. 置于沸水中孵育2分钟
11. 涡旋震荡20秒,直至充分混匀
12. 重复实验步骤10至11一次
13. 放进40℃恒温水槽均衡温度15分钟
14. 加入xx微升酶解液A(Reagent C),混匀
15. 放进40℃恒温水槽孵育60分钟
16. 放进台式离心机离心10分钟,速度为1000g
17. 小心移取50微升上清液到1.5毫升离心管
18. 加入xx微升酶解液B(Reagent D),混匀
19. 放进40℃恒温水槽孵育15分钟
20. 置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存
二、 背景对照测定
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent E)到新的比色皿
2. 加入xx微升底物液(Reagent F)
3. 加入xx微升阴性液(Reagent H)
4. 上下倾倒数次,混匀
5. 放进40℃培养箱里孵育2分钟,避免光照
6. (选择步骤)放进分光光度仪,置零
7. (选择步骤)取出比色皿
8. 加入xx微升反应液(Reagent G)
9. 上下倾倒数次,混匀
10. 放进40℃培养箱里孵育20分钟,避免光照
11. 即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照(此为终点读数)
三、 样品测定
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent E)到新的比色皿
2. 加入xx微升底物液(Reagent F)
3. 加入100微升上述制备的待测样品(注意:样品须清澈)
4. 上下倾倒数次,混匀
5. 放进40℃培养箱里孵育2分钟,避免光照
6. (选择步骤)放进分光光度仪,置零
7. (选择步骤)取出比色皿
8. 加入xx微升反应液(Reagent G)
9. 上下倾倒数次,混匀
10. 放进40℃培养箱里孵育20分钟,避免光照
11. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数(此为终点读数)
四、 计算样品含量
1) 浓度计算
2)转换计算(微克)
五、 酶标板测定
1. 在96孔酶标板上做好相应标记:背景对照和样品
2. 分别移取xx微升缓冲液(Reagent E)到相应孔中
3. 分别加入xx微升底物液(Reagent F)
4. 分别加入xx微升阴性液(Reagent H)或上述制备的待测样品(注意:样品须清澈)
5. 轻轻摇动酶标板
6. 放进40℃培养箱里2分钟,避免光照
7. 分别加入xx微升反应液(Reagent G)
8. 轻轻摇动酶标板
9. 放进40℃培养箱里20分钟,避免光照
10. 即刻放进酶标仪测读(此为终点读数)
11. 含量计算
1)浓度计算
2)转换计算(微克)
注意事项
1. 本产品为20次操作,包括背景对照
2. 本产品检测范围为1至100微克/毫升
3. 建议使用比色皿检测
4. 操作时,须戴手套
5. 系统操作过程中,背景测定只需1次
6. 样品须澄清,至关重要
7. 测定值由低到高变化
8. 比色测定后,比色皿须清洗彻底
9. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
10. 本公司提供系列葡聚糖检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS19018.5 燕麦β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒 20/80次
G&VS19018.5A 萃取液(Reagent A) 500毫升
G&VS19018.5B 平衡液(Reagent B) 100毫升
G&VS19018.5C 酶解液A(Reagent C) 10毫升
G&VS19018.5D 酶解液B(Reagent D) 5毫升
G&VS19018.5E 缓冲液(Reagent E) 100毫升
G&VS19018.5F 底物液(Reagent F) 10毫升
G&VS19018.5G 反应液(Reagent G) 5毫升
G&VS19018.5H 阴性液(Reagent H) 10毫升
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19018.1 | 大麦β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19018.2 | 麦芽β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19018.3 | 麦芽汁β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19018.4 | 啤酒糟β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19018.5 | 燕麦β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19018.6 | 酵母β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19018.7 | 蘑菇β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19190.1 | 大麦β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19190.2 | 麦芽β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19190.3 | 麦芽汁β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19190.4 | 啤酒糟β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19190.5 | 燕麦β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19190.6 | 酵母β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19190.7 | 蘑菇β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19191.1 | 大麦β-葡聚糖含量荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19191.2 | 麦芽β-葡聚糖含量荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19191.3 | 麦芽汁β-葡聚糖含量荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19191.4 | 啤酒糟β-葡聚糖含量荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19191.5 | 燕麦β-葡聚糖含量荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19191.6 | 酵母β-葡聚糖含量荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19191.7 | 蘑菇β-葡聚糖含量荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
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