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发布时间:2026/11/4 11:25:42 阅读次数:3
果菜抗坏血酸比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
果菜抗坏血酸比色法定量检测试剂是一种旨在通过抗坏血酸氧化酶去除干扰的前提下,使用显色底物受到抗坏血酸还原后,产生蓝紫色甲瓒产物,即采用比色法测算果菜样品中抗坏血酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种食用性植物,包括叶片(leaf)、种子(seed)等样品抗坏血酸含量的检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
抗坏血酸(L-ascorbic acid),又称为维生素C(vitamin C),是一种抗氧化、抗炎、抗病毒、自由基清除剂和免疫增强剂,普遍存在于生物样品中,包括水果和蔬菜中,例如柑橘类、瓜类、番茄、辣椒类、椰菜、土豆、萝卜等。其常用于酒类、乳品类中,有益于质量保证。作为食品添加剂(E300),既能抗氧化,又能增强口味。同时具有保护细胞免受氧化损伤。首先通过使用抗坏血酸氧化酶(ascorbate oxidase)去除样品中其它还原成分的干扰,同时显色底物二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyl-tetrazolium bromide;MTT),简称噻唑盐染料,在电子携带者吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)存在的情况下,受到抗坏血酸的还原,产生蓝紫色的甲瓒产物,进而在分光光度仪(578nm 波长)下,定量测定样品中抗坏血酸的含量。其反应方式为:
产品内容
处理液(Reagent A) 毫升
缓冲液(Reagent B) 毫升
去干扰液(Reagent C)毫升
底物液(Reagent D) 毫升
反应液(Reagent E) 毫升
阴性液(Reagent F) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存去干扰液(Reagent C)、底物液(Reagent D)和反应液(Reagent E)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(Reagent D)避免光照;有效保证6月
用户自备
DOUNCE匀浆器:用于植物组织裂解处理
尼龙丝或60微米尼龙网:用于样品澄清处理
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
台式离心机:用于样品操作
培养箱:用于反应孵育
比色皿或酶标板:用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪:用于比色分析
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂放进冰槽里融化,底物液(Reagent D)避免光照。同时设定好分光光度仪:波长578nm,并置零。然后进行下列操作。
一、 (选择操作)样品准备(注意:参见注意事项5)
1. 准备好新鲜的食用性植物组织(叶片、种子等),并秤重以确定1克组织重量
2. 用刀片切碎组织
3. 移入一个液氮冻存管
4. 即刻放进液氮罐过夜
5. 次日从液氮罐里取出,即刻(最快速度)研磨组织成粉末(注意:切莫使组织冻融)
6. 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
7. 加入预冷的xx毫升处理液(Reagent A)
8. 涡旋震荡5秒,充分混匀
9. 即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器
10. 置于冰槽里用匀浆棒匀化组织(约80下)
11. 准备1个小型漏斗,内衬尼龙丝或60微米尼龙网,置于15毫升锥形离心管上
12. 将所有组织匀浆液移入到小型漏斗里过滤
13. 放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为10000g
14. 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管
15. 置于冰槽里备用
二、 样品背景对照测定
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent B)到新的比色皿
2. 加入xx微升去干扰液(Reagent C)
3. 加入100微升上述制备的待测样品
4. 放进37℃培养箱里孵育3分钟
5. 加入xx微升底物液(Reagent D)
6. 上下倾倒数次,混匀
7. 放进分光光度仪,置零
8. 取出比色皿
9. 加入xx微升反应液(Reagent E)
10. 上下倾倒数次,混匀
11. 放进37℃培养箱里孵育30分钟,避免光照
12. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品背景对照读数(30分钟—0分钟读数)
三、 样品测定
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent B)到新的比色皿
2. 加入xx微升阴性液(Reagent F)
3. 加入100微升上述制备的待测样品
4. 放进37℃培养箱里孵育3分钟
5. 加入xx微升底物液(Reagent D)
6. 上下倾倒数次,混匀
7. 放进分光光度仪,置零
8. 取出比色皿
9. 加入xx微升反应液(Reagent E)
10. 上下倾倒数次,混匀
11. 放进37℃培养箱里孵育30分钟,避免光照
12. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数(30分钟—0分钟读数)
四、 计算样品含量
五、 酶标板测定
1. 在96孔酶标板上做好相应标记:样品背景对照和待测样品
2. 分别移取xx微升缓冲液(Reagent B)到所有孔里
3. 移取xx微升抗干扰液(Reagent C)到样品背景对照孔里
4. 移取xx微升阴性液(Reagent F)到待测样品孔里
5. 分别加入25微升待测样品到所有孔里
6. 放进37℃培养箱里3分钟
7. 分别加入xx微升底物液(Reagent D)到所有孔里
8. 轻轻摇动酶标板
9. 即刻放进酶标仪测读(此为0分钟读数)
10. 分别加入xx微升反应液(Reagent E)
11. 轻轻摇动酶标板
12. 放进37℃培养箱里30分钟,避免光照
13. 即刻放进酶标仪测读(此为30分钟终点读数)
14. 实际读数:30分钟读数—0分钟读数
15. 含量计算:
注意事项
1. 本产品为20次(比色皿)和80次(酶标板)操作
2. 本产品检测范围为0.5至250微克
3. 建议使用比色皿检测
4. 操作时,须戴手套
5. 建议样品须澄清(去色、去脂、去蛋白、去气体等);本公司提供抗坏血酸待测样品处理试剂盒-G&VS19014.12
6. 每个样品均须样品背景测定
7. 样品须澄清,至关重要
8. 测定值由低到高变化,表明样品抗坏血酸阳性
9. 比色测定后,比色皿须清洗彻底
10. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
11. 本公司提供系列抗坏血酸检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS19014.1 果菜抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 20/80次
G&VS19014.1A 处理液(Reagent A) 500毫升
G&VS19014.1B 缓冲液(Reagent B) 100毫升
G&VS19014.1C 抗干扰液(Reagent C) 10毫升
G&VS19014.1D 底物液(Reagent D) 10毫升
G&VS19014.1E 反应液(Reagent E) 10毫升
G&VS19014.1F 阴性液(Reagent F) 10毫升
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19014.1 | 果菜抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.2 | 食物抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.3 | 酒类抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.4 | 饮料抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.5 | 乳品抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.6 | 肉类抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.7 | 药片抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.8 | 细胞抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.9 | 组织抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.10 | 体液抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.11 | 细胞培养液抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19014.12 | 抗坏血酸待测样品处理试剂盒 | 20次 |
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