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通用型总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/11/4 11:29:39      阅读次数:3

 

通用型总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

 通用型总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂是一种旨在通过乙醇去脂、伴刀豆球蛋白 A 分离等处理后,由淀粉葡糖苷酶和α-淀粉酶水解直链淀粉成葡萄糖,在葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的双 酶反应系统下,测定样品中的水解产物葡萄糖转化过程中,有色醌亚胺的吸光峰值的变化,即采用比色法 测算样品中总淀粉+直链+支链淀粉含量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功 实验证明的。其适用于各种植物淀粉、包括谷类、面粉、食物等样品中总淀粉+直链+支链淀粉的检测。产 品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

技术背景

淀粉(starch),又称为amylum,是多聚糖碳水化合物,由大量的葡萄糖单位通过糖苷键(glycosidic bond) 连接而成。分子式为(C6H10O5)n  。所有绿色植物产生淀粉,作为能源储备,也是人类的主要食物来源。淀 粉在显微镜下, 根据其形态、大小、晶体结构、光极性等特征, 可以分成各种淀粉粒型(starch granule type) 。 淀粉分成两类:直链淀粉(amylose)和支链淀粉(amylopectin)。直链淀粉以α 1,4-线性链接的多聚体,  占植物淀粉的25%,而支链淀粉以α 1,6-侧枝链接的α 1,4-多聚体,占75%,例如糖原的形式是支链淀粉。  直链淀粉(amylose) 是谷类淀粉(cereal starch) 的重要质量参数。在加工过程中, 谷类淀粉胶状化和溶解 性、以及水稻的烹饪和结构特征取决于直链淀粉的含量。支链淀粉是α-D-吡喃糖基单元通过1-4或1-6糖苷 键连接的聚合物,分子量大,结构复杂,可以分成A、B、C型。支链淀粉具有糊化、凝胶特性和抗老化能 力。运用替代碘试法的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶偶联反应技术,避免其不确定性的缺陷,通过伴刀豆球 蛋白A  (Con A) 与支链多糖结合, 分离出纯化的直链淀粉, 经过淀粉葡糖苷酶(amyloglucosidase) 和α- 淀粉酶(α-amylase)共同作用水解为葡萄糖,葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)氧化葡萄糖为葡萄糖酸    (gluconate) 和过氧化氢, 与4-氨基安替比林(4-aminoantipyrine;  4-AA) 反应, 过氧化物酶(peroxidase) 帮助生成红色的有色醌亚胺(quinoneimine dye),在分光光度仪(510nm  波长) 下, 获得吸光峰值的变化, 来分析样品中总淀粉、直链淀粉和支链淀粉的含量,其反应方式为:

 

 

产品内容

 

融化液(Reagent A)

毫升

去脂液(Reagent B)

毫升

清理液(Reagent C)

毫升

结合液(Reagent D)

毫升

酸性液(Reagent E)

毫升

酶解液(Reagent F)

毫升

缓冲液(Reagent G)

毫升

催化液(Reagent H)

毫升

标准液(Reagent I)

微升

产品说明书

1 份

 


保存方式

保存 清理液(Reagent C)、结合液(Reagent D)、酶解液(Reagent F)和  催化液(Reagent H) 在-20℃冰箱里, 其余的保存在 4℃冰箱里; 缓冲液(Reagent G)、 催化液(Reagent H)和 标准液(Reagent I)避免光照;有效保证 6 月

用户自备

1.5 毫升离心管:用于标准样品处理和检测反应操作的容器

2 毫升离心管:用于直链淀粉样品处理的容器

15 毫升锥形离心管:用于样品处理的容器

50 毫升锥形离心管:用于样品预处理的容器

电热炉:用于样品煮沸处理

涡旋震荡仪:用于样本混匀

(微型)台式离心机:用于样品沉淀

恒温水槽或培养箱:用于样品反应孵育

比色皿:用于比色的容器

分光光度仪:用于比色分析

 

实验步骤

实验开始前, 将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化, 催化液(Reagent H) 避免光 照。同时设定好分光光度仪:波长 510nm ,并置零。然后进行下列操作。

 

一、  淀粉样品分离制备

1 .  精确秤取 25 毫克淀粉样品到 15 毫升锥形离心管

2 .  加入    毫升 融化液(Reagent A)

3 .  温和涡旋震荡 1 分钟

4 .  煮沸 15 分钟, 其间每隔 3 分钟强力涡旋震荡 15 秒(注意:确保内容物均匀分布)

5 .  室温下,静置 5 分钟

6 .  加入    毫升 去脂液(Reagent B)

7 .  强力涡旋震荡 1 分钟

8 .  加入    毫升 去脂液(Reagent B)

9 .  上下倾倒混匀数次

10.室温下,静置 30 分钟(注意: 可见沉淀出现)

11.放进台式离心机离心 5 分钟,速度为 2000g

12.小心抽去上清液

13.空气中晾干

14.加入    毫升 融化液(Reagent A)

15.温和涡旋震荡 1 分钟

16.煮沸 15 分钟, 其间每隔 3 分钟强力涡旋震荡 15 秒(注意:确保内容物均匀分布)

17.即刻加入    毫升 清理液(Reagent C)

18.温和涡旋震荡 1 分钟

19.转移到 50 毫升锥形离心管

20.加入    毫升 清理液(Reagent C) 清洗 15 毫升锥形离心管

21.转移清洗残留物合并到上述 50 毫升锥形离心管

22.重复实验步骤 20 至 21 一次

23.加入    毫升 清理液(Reagent  C),混匀(注意:总共25  毫升成为1  毫克/毫升样品;作 为直链淀粉和总淀粉样品制备的预处理;须即刻使用,不能保存)

24.继续按照下列操作制备直链淀粉(操作一)和总淀粉(操作二)

 

操作一:直链淀粉和支链淀粉分离制备

1.  移取 1 毫升上述制备的预处理液到新的 2 毫升离心管,标记为直链淀粉

2.  加入    毫升 结合液(Reagent D)

3.  上下倾倒混匀数次

4.  室温下静置 60 分钟

5.  放进微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 16000g  (或 13000RPM,例如 eppendorf 5415)

6.  小心移取 1 毫升上清液到 15 毫升锥形离心管(注意: 须2  小时内使用,不能保存)

7.  加入    毫升 酸性液(Reagent E),混匀

8.  煮沸 5 分钟

9.  放进 40℃恒温水槽孵育 5 分钟

10.加入    微升 酶解液(Reagent F)

11.放进 40℃恒温水槽孵育 30 分钟

12.放进台式离心机离心 5 分钟,速度为 2000g

13.移取上清液到新的 15 毫升离心管

14.置于室温下备用

 

操作二:总淀粉制备

1.  移取 500 微升上述制备的预处理液到新的 15 毫升锥形离心管,标记为总淀粉

2.  加入    毫升 酸性液(Reagent E),混匀

3.  加入    微升 酶解液(Reagent F)

4.  放进 40℃恒温水槽孵育 10 分钟

5.  放进台式离心机离心 5 分钟,速度为 2000g

6.  移取上清液到新的 15 毫升锥形离心管

7.  置于室温下备用

 

操作三:标准液制备

1 .  准备 5 管 1.5 毫升离心管,标记为 A 至 E 号管

2 .  按下表分别加入试剂 ,混匀

管号

酸性液

(Reagent E)

标准液

(Reagent I)

测定体系  标准淀粉含量

A

微升

微升

微克

B

微升

微升

微克

 

C

微升

微升

微克

D

微升

微升

微克

E

微升

0

空对照

 

3.  分别加入    微升 酶解液(Reagent F)

4.  放进 40℃恒温水槽孵育 10 分钟

5.  放进台式离心机离心 5 分钟,速度为 2000g

6.  分别移取上清液到新的 1.5 毫升离心管

7.  置于室温下备用

 

二、  比色测定

1.  准备 7 个 1.5 毫升离心管,分别标记为: 5 个标准样(包括空对照)、直链淀粉、总淀粉

2.  分别加入    微升 缓冲液(Reagent G) 到每个离心管

3.  分别加入    微升上述制备的稀释的 标准液(Reagent I) 到标准样管

4.  加入 200 微升上述制备的直链淀粉样品到直链淀粉管

5.  加入 200 微升上述制备的总淀粉样品到总淀粉管

6.  分别加入    微升 催化液(Reagent H) 到所有离心管,混匀

7.  放进 40℃恒温水槽或培养箱孵育 20 分钟, 避免光照

8.  转移到比色皿

9.  即刻放进分光光度仪检测:波长 510nm

10.获得相应吸光读数:样品读数-背景空对照读数

 

三、  含量计算

1 .  构建测定体系淀粉含量标准曲线:纵座标(Y)为标准样品吸光值 OD510 读数,横座标(X)为对应 的淀粉含量(微克)

2 .  根据标准曲线获得样品对应淀粉含量

3 .  计算样品实际淀粉含量:总淀粉、直链淀粉和支链淀粉

1)总淀粉和直链淀粉含量

2)支链淀粉含量

3)样品总淀粉中直链淀粉和支链淀粉的百分比浓度

4) 样品重量中总淀粉、直链淀粉、支链淀粉的重量百分比浓度(毫克/毫克%)

根据微克淀粉/毫克样品换算

 

注意事项

1 .  本产品为 25 次(10 个样本)操作,包括标准测定

2 .  本产品检测范围为 0.4 至 2 毫克/毫升淀粉

3 .  操作时,须戴手套

4 .  样品制备后,须在 2 小时内检测,不宜保存

5 .  系统操作过程中,标准测定只需 1 次

6 .  背景空对照小于 0.05 为理想状态

7 .  孵育时,避免光照

8 .  比色测定后,比色皿须清洗彻底

9 .  如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度

10.本公司提供系列淀粉检测试剂产品

 

质量标准

1 .  本产品经鉴定性能稳定

2 .  本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ,  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

 

编号

名称

规格

G&VS19010.3. 1

通用型总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19010.3. 1A

融化液(Reagent A)

100 毫升

G&VS19010.3. 1B

去脂液(Reagent B)

100 毫升

G&VS19010.3. 1C

清理液(Reagent C)

500 毫升

G&VS19010.3. 1D

结合液(Reagent D)

100 毫升

G&VS19010.3. 1E

酸性液(Reagent E)

100 毫升

G&VS19010.3. 1F

酶解液(Reagent F)

10 毫升

产品编号

名称

规格

G&VS19010. 1. 1

通用型直链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19010. 1.2

食物直链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19010. 1.3

植物直链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19010.2. 1

通用型支链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19010.2.2

食物支链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19010.2.3

植物支链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19010.3. 1

通用型总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19010.3.2

食物总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19010.3.3

植物总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒

20 次

 


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