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发布时间:2026/11/4 11:31:14 阅读次数:3
细胞培养上清氨含量光谱法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
细胞培养上清氨含量光谱法定量检测试剂是一种旨在通过谷氨酸脱氢酶反应系统中,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光谱法来测定样品中氨含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体、动物等培养细胞上清样品等氨水平检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,建立自动化体系。
技术背景
氨(ammonia)是氮和氢结合在一起的具有刺激性气味的自然化合物,分子式是NH3,分子量为17.031。其质子化(protonated)形式是NH4。存在于含氮性动物和植物中,以及雨水、海水、沃土中。氨是生物体所需的氮的来源;同时生物体在固氮过程中和氨基酸脱氨基代谢反应中,产生氨。人体通过肾脏分泌氨,以中和过多的酸性,而获得酸碱平衡,或通过肝脏尿素循环(urea cycle)快速转化成尿素。氨作为食物和饲料的前体,成为陆栖生物的营养成分,也用于药物、肥料、抗菌剂、日化洗洁产品中,以及作为果汁、牛奶、奶酪、海鲜、烘赔食品的质量标示剂。肝功能异常导致高氨血症(hyperammonemia)。血液氨含量检测用于诊断肝昏迷和急性脑病合并内脏脂肪变性综合症(Reye’s syndrome)。基于在谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase;GIDH)的存在作用下,底物氨分子和2-酮戊二酸(2-oxoglutarate)反应,产生谷氨酸(glutamate), 同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADPH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NADP),在分光光度仪下产生吸光峰值的变化(340nm波长),由此定量分析氨的含量。其反应系统如下:
产品内容
缓冲液(Reagent A) 毫升
反应液(Reagent B) 毫升
底物液(Reagent C) 毫升
阴性液(Reagent D) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证6月
用户自备
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
台式离心机:用于样品制备
比色皿:用于光谱分析的容器
分光光度仪:用于光谱分析
实验步骤
一、 样品准备
1. 移取5毫升待测细胞培养基到15毫升锥形离心管
2. 放进台式离心机离心10分钟,速度为1500g
3. 移取上清液到新的15毫升锥形离心管
4. (选择步骤)可以加入适量的用户自备的无离子水稀释(注意:通常稀释5至10倍)
5. (选择步骤)过滤纸过滤(如果离心处理,样品仍然不清澈)
6. 封口膜封口备用
二、测定准备
1. 准备好待测样品,置于冰槽里
2. 设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,并置零
3. 缓冲液(Reagent A)室温下均衡温度
三、 样品测定
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿
2. 加入xx微升反应液(Reagent B)
3. 加入xx微升底物液(Reagent C)
4. 放进25℃恒温水槽孵育3分钟
5. 加入xx微升待测样品或阴性液(Reagent D)(注意:样品须清澈)
6. 上下倾倒数次,混匀
7. 放进25℃恒温水槽孵育10分钟
8. 即刻放进分光光度仪检测
9. 获得吸光读数:背景读数和样品读数
四、计算样品浓度
注意事项
1. 本产品为20次操作,包括背景对照
2. 本产品检测范围是10至1000微摩尔
3. 样品中避免含有高浓度蛋白,以及各种金属元素,例如铜、银、汞、铁、锌等
4. 操作时,须戴手套
5. 系统操作过程中,背景测定只需1次
6. 样品须澄清,至关重要
7. 测定值由高到低变化
8. 比色测定后,比色皿须清洗彻底
9. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
10. 氨浓度换算:1毫摩尔/升=17.03微克/毫升
11. 用户可以使用氨含量荧光定量检测试剂盒进行微量检测
12. 本公司提供系列生化学检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS19008.6 细胞培养上清氨含量光谱法定量检测试剂盒 20次
G&VS19008.6A 缓冲液(Reagent A) 毫升
G&VS19008.6B 反应液(Reagent B) 毫升
G&VS19008.6C 底物液(Reagent C) 毫升
G&VS19008.6D 阴性液(Reagent D) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19008.1 | 酒类氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.2 | 饮料氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.3 | 食物氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.4 | 饲料氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.5 | 化妆品氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.6 | 细胞培养上清氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.7 | 水样品氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.8 | 细胞氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.9 | 组织氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.10 | 体液氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.11 | 植物氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.12 | 真菌/酵母氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.13 | 细菌氨含量光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19008.14 | 氨待测样品处理试剂盒 | 20次 |
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