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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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生物样品乙酸激酶法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/11/4 11:32:40 阅读次数：4

生物样品乙酸激酶法定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

生物样品乙酸激酶法定量检测试剂是一种旨在通过乙酸激酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环反应系统中，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化反应后吸光峰值的变化，即采用比色法来测定样品中乙酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种生物样品，包括动物、人体、酵母、细菌等裂解或培养上清乙酸含量的检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

乙酸（CH₃COOH）是国际纯粹（理论）与应用化学联合会（IUPAC）建议名称，在化学命名法中的系统称谓是乙醇酸，中文称之为醋酸，而无水纯乙酸则称为冰乙酸。乙酸是一种最简单的弱性有机羧酸和典型的脂肪酸，普遍存在于各种食品、饮料，甚至纸业、药业和工业材料中。在啤酒和葡萄酒等酒类饮料加工中，乙醇发酵或苹果酸/乳酸发酵过程会产生少量乙酸。作为挥发性酸度（VA）的标准指数，乙酸浓度已成为评价葡萄酒质量的重要指标之一。在碳酸饮料、醋酸饮料和咖啡饮料中，乙酸作为添加剂，起到防腐和调节酸度的作用。联合国食品和农业组织与世界卫生组织制定的食品添加剂通用标准（GSFA）中规定，在牛奶、咖啡、茶、麦茶等饮料中，可以按照良好食品生产规范（GMP）的要求添加乙酸。而在果汁饮料中，乙酸非自然存在，也不允许添加，所以如有乙酸存在，则表明果汁或水果原料已经腐败。采用有效的检测方法是防止发生乙酸中毒事件的重要手段之一。基于底物乙酸，在ATP存在的条件下，通过乙酸激酶（acetate kinase）的催化，转化为乙酰磷酸（acetyl-phosphate和二磷酸腺苷（ADP）；进而通过丙酮酸激酶（pyruvate kinase；PK）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase；LDH）反应系统中，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），其吸光峰值的变化（340nm），来定量分析乙酸的含量。其反应方式为：

产品内容

裂解液（Reagent A）毫升

缓冲液（Reagent B）毫升

酶促液（Reagent C）微升

反应液（Reagent D）微升

底物液（Reagent E）微升

阴性液（Reagent F）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里；底物液（Reagent E）避免光照；有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于样品制备的容器

微型台式离心机：用于样品操作

比色皿或酶标板：用于比色的容器

分光光度仪或酶标仪：用于比色分析

实验步骤

一、样品准备 （注意：参见注意事项7和8）

选择一：培养细胞或细菌

1．准备好1毫升待测细胞或细菌

2．转移到到1.5毫升离心管

3．放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为1000g

4．小心抽去上清液

5．加入xx微升裂解液（Reagent A）

6．涡旋震荡15秒

7．置于冰槽里孵育30分钟

8．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为10000g

9．小心移取上清液到新的1.5毫升离心管

10．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

11．即刻置于冰槽里备用或放进－20℃冰箱里保存

选择二：细胞或细菌培养液上清等

1．移取1毫升细胞或细菌培养液到1.5毫升离心管

2．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

3．小心移取100微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管

4．即刻置于冰槽里备用或放进－20℃冰箱里保存

一、 测定准备

1. 开启并设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长340nm

2. 从－20℃冰箱里取出试剂，置于冰槽里融化；底物液（Reagent E）避免光照

3. 缓冲液（Reagent B）室温下均衡温度

二、 背景对照测定

1．移取xx微升缓冲液（Reagent B）到新的比色皿

2．加入xx微升酶促液（Reagent C）

3．加入xx微升反应液（Reagent D）

4．加入xx微升底物液（Reagent E）

5．加入xx微升阴性液（Reagent F）

6．上下倾倒数次，混匀

7．在25℃温度下孵育10分钟

8．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照

三、 样品测定

1．移取xx微升缓冲液（Reagent B）到新的比色皿

2．加入xx微升酶促液（Reagent C）

3．加入xx微升反应液（Reagent D）

4．加入xx微升底物液（Reagent E）

5．加入10微升待测样品（50微克蛋白）（注意：样品须清澈）

6．上下倾倒数次，混匀

7．在25℃温度下孵育10分钟

8．即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数

五、计算样品活性

六、 酶标板测定

1．在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照和样品

2．分别移取xx微升缓冲液（Reagent B）到96孔板中的所有孔里

3．分别加入xx微升酶促液（Reagent C）

4．分别加入xx微升反应液（Reagent D）

5．分别加入xx微升底物液（Reagent E）

6．分别加入10微升阴性液（Reagent F）或待测样品到相应孔中（注意：样品须清澈）

7．轻轻摇动酶标板

8．在25℃温度下孵育10分钟

9．即刻放进酶标仪检测

10．活性计算

注意事项

1．本产品为20次操作，包括背景对照

2．本产品检测敏感度为2微摩尔/升（0.12毫克/升）

3．操作时，须戴手套

4．系统操作过程中，背景测定只需1次

5．样品须澄清，至关重要

6．乙酸是一种挥发性物质，因此样品处理时，不应该加热、干燥、暴露于空气中等，如果无法避免，可使用氢氧化钠调整pH，使其转化为乙酸盐

7．如果样品中存在高浓度的蛋白、脂肪酸、酚类等物质，建议进行样品预处理（去色、去脂、去蛋白、去气体等）；本公司提供乙酸待测样品处理试剂盒－G&VS19002.11

8．比色测定后，比色皿须清洗彻底

9．测定值由高到低变化，表明样品乙酸阳性

10．反应10分钟后比色测定值趋于稳定；如果仍有波动，建议适当延长检测时间，直至读数稳定

11．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度

12．本公司提供系列乙酸检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS19003.10 生物样品乙酸激酶法定量检测试剂盒 20次

G&VS19003.10A 裂解液（Reagent A）毫升

G&VS19003.10B 缓冲液（Reagent B）毫升

G&VS19003.10C 酶促液（Reagent C）毫升

G&VS19003.10D 反应液（Reagent D）毫升

G&VS19003.10E 底物液（Reagent E）毫升

G&VS19003.10F 阴性液（Reagent F）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS19002.11	乙酸待测样品处理试剂盒	20次
G&VS19003.1	酒类乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次
G&VS19003.2	饮料乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次
G&VS19003.3	调料乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次
G&VS19003.4	烘赔食品乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次
G&VS19003.5	乳品乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次
G&VS19003.6	蔬菜乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次
G&VS19003.7	肉类乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次
G&VS19003.8	药品乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次
G&VS19003.9	饲料乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次
G&VS19003.10	生物样品乙酸激酶法定量检测试剂盒	20次