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发布时间:2026/11/4 11:33:26 阅读次数:4
调料乙酸含量激酶法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
调料乙酸含量激酶法定量检测试剂盒是一种旨在通过乙酸激酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环反应系统中,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化反应后吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样品中乙酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种调料样品,包括醋、调味品、酸性填馅调料等乙酸含量的检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
乙酸(CH3COOH)是国际纯粹(理论)与应用化学联合会(IUPAC)建议名称,在化学命名法中的系统称谓是乙醇酸,中文称之为醋酸,而无水纯乙酸则称为冰乙酸。乙酸是一种最简单的弱性有机羧酸和典型的脂肪酸,普遍存在于各种食品、饮料,甚至纸业、药业和工业材料中。在啤酒和葡萄酒等酒类饮料加工中,乙醇发酵或苹果酸/乳酸发酵过程会产生少量乙酸。作为挥发性酸度(VA)的标准指数,乙酸浓度已成为评价葡萄酒质量的重要指标之一。在碳酸饮料、醋酸饮料和咖啡饮料中,乙酸作为添加剂,起到防腐和调节酸度的作用。联合国食品和农业组织与世界卫生组织制定的食品添加剂通用标准(GSFA)中规定,在牛奶、咖啡、茶、麦茶等饮料中,可以按照良好食品生产规范(GMP)的要求添加乙酸。而在果汁饮料中,乙酸非自然存在,也不允许添加,所以如有乙酸存在,则表明果汁或水果原料已经腐败。采用有效的检测方法是防止发生乙酸中毒事件的重要手段之一。基于底物乙酸,在ATP存在的条件下,通过乙酸激酶(acetate kinase)的催化,转化为乙酰磷酸(acetyl-phosphate和二磷酸腺苷(ADP);进而通过丙酮酸激酶(pyruvate kinase;PK)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase;LDH)反应系统中,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD),其吸光峰值的变化(340nm),来定量分析乙酸的含量。其反应方式为:
产品内容
平衡液(Reagent A) 毫升
缓冲液(Reagent B) 毫升
酶促液(Reagent C) 微升
反应液(Reagent D) 微升
底物液(Reagent E) 微升
阴性液(Reagent F) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存平衡液(Reagent A)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里;底物液(Reagent E)避免光照;有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于样品制备的容器
50毫升锥形离心管:用于样品制备的容器
微型台式离心机:用于样品操作
比色皿或酶标板:用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪:用于比色分析
实验步骤
一、样品准备 (注意:参见注意事项6和7)
选择一:粘稠液态或固体调料样品
1. 秤取1克样品品到50毫升锥形离心管
2. 加入xx毫升平衡液(Reagent A),混匀
3. 放进4℃冰箱里静置30分钟
4. 移取上层液相进行过滤纸过滤,去除不溶性固体颗粒
5. 即刻置于冰槽里备用或放进-20℃冰箱里保存
选择二:液体调料样品
1. 移取1毫升液体调料样品到1.5毫升离心管
2. 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
3. 小心移取上清液到新的预冷的1.5毫升离心管
4. (选择步骤)如果是醋类液体调料,移取5微升到1.5毫升离心管
5. (选择步骤)加入xx毫升平衡液(Reagent A),混匀(注意:计算时的稀释倍数)
6. 即刻置于冰槽里备用或放进-20℃冰箱里保存
二、 测定准备
1. 开启并设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm
2. 从-20℃冰箱里取出试剂,置于冰槽里融化;底物液(Reagent E)避免光照
3. 缓冲液(Reagent B)室温下均衡温度
三、 背景对照测定
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent B)到新的比色皿
2. 加入xx微升酶促液(Reagent C)
3. 加入xx微升反应液(Reagent D)
4. 加入xx微升底物液(Reagent E)
5. 加入xx微升阴性液(Reagent F)
6. 上下倾倒数次,混匀
7. 在25℃温度下孵育10分钟
8. 即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照
四、 样品测定
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent B)到新的比色皿
2. 加入xx微升酶促液(Reagent C)
3. 加入xx微升反应液(Reagent D)
4. 加入xx微升底物液(Reagent E)
5. 加入10微升待测样品(50微克蛋白)(注意:样品须清澈)
6. 上下倾倒数次,混匀
7. 在25℃温度下孵育10分钟
8. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数
五、计算样品活性
六、 酶标板测定
1. 在96孔酶标板上做好相应标记:背景对照和样品
2. 分别移取xx微升缓冲液(Reagent B)到96孔板中的所有孔里
3. 分别加入xx微升酶促液(Reagent C)
4. 分别加入xx微升反应液(Reagent D)
5. 分别加入xx微升底物液(Reagent E)
6. 分别加入10微升阴性液(Reagent F)或待测样品到相应孔中(注意:样品须清澈)
7. 轻轻摇动酶标板
8. 在25℃温度下孵育10分钟
9. 即刻放进酶标仪检测
10. 活性计算
注意事项
1. 本产品为20次操作,包括背景对照
2. 本产品检测敏感度为2微摩尔/升(0.12毫克/升)
3. 操作时,须戴手套
4. 系统操作过程中,背景测定只需1次
5. 样品须澄清,至关重要
6. 乙酸是一种挥发性物质,因此样品处理时,不应该加热、干燥、暴露于空气中等,如果无法避免,可使用氢氧化钠调整pH,使其转化为乙酸盐
7. 如果样品中存在高浓度的蛋白、脂肪酸、酚类等物质,建议进行样品预处理(去色、去脂、去蛋白、去气体等);本公司提供乙酸待测样品处理试剂盒-G&VS19002.11
8. 比色测定后,比色皿须清洗彻底
9. 测定值由高到低变化,表明样品乙酸阳性
10. 反应10分钟后比色测定值趋于稳定;如果仍有波动,建议适当延长检测时间,直至读数稳定
11. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
12. 本公司提供系列乙酸检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号 名称 规格
G&VS19003.3 调料乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 20次
G&VS19003.3A 平衡液(Reagent A) 毫升
G&VS19003.3B 缓冲液(Reagent B) 毫升
G&VS19003.3C 酶促液(Reagent C) 毫升
G&VS19003.3D 反应液(Reagent D) 毫升
G&VS19003.3E 底物液(Reagent E) 毫升
G&VS19003.3F 阴性液(Reagent F) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19002.11 | 乙酸待测样品处理试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.1 | 酒类乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.2 | 饮料乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.3 | 调料乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.4 | 烘赔食品乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.5 | 乳品乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.6 | 蔬菜乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.7 | 肉类乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.8 | 药品乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.9 | 饲料乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19003.10 | 生物样品乙酸含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
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