当前位置:首页>技术专栏
发布时间:2026/11/4 11:45:58 阅读次数:3
通用型直链淀粉比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
通用型直链淀粉比色法定量检测试剂是一种旨在通过乙醇去脂、伴刀豆球蛋白 A 去支链淀粉等 处理后,由淀粉葡糖苷酶和α-淀粉酶水解直链淀粉成葡萄糖,在葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的双酶反应 系统下,测定样品中的水解产物葡萄糖转化转化过程中,有色醌亚胺的吸光峰值的变化, 即采用比色法测 算直链淀粉含量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于 各种植物淀粉、包括谷类、面粉、食物等样品中直链淀粉的检测。产品严格无菌,即到即用, 操作简捷,性能稳定。
技术背景
直链淀粉(amylose) 是谷类淀粉(cereal starch) 的重要质量参数。在加工过程中, 谷类淀粉胶状化和溶解 性、以及水稻的烹饪和结构特征取决于直链淀粉的含量。替代碘试法葡萄糖氧化酶和过氧化物酶偶联反应 技术, 避免其传统方法不确定性的缺陷, 通过伴刀豆球蛋白A (Con A) 与支链多糖结合, 分离出纯化的直 链淀粉,经过淀粉葡糖苷酶(amyloglucosidase)和α-淀粉酶(α-amylase)共同作用水解为葡萄糖,葡 萄糖氧化酶(glucose oxidase) 氧化葡萄糖为葡萄糖酸(gluconate)和过氧化氢,与4-氨基安替比林(4-aminoantipyrine;4-AA)反应,过氧化物酶(peroxidase)帮助生成红色的有色醌亚胺(quinoneimine dye), 在分光光度仪(510nm 波长)下,获得葡萄糖浓度,来分析样品中直链淀粉的含量。其反应方式为:
| 产品内容 |
|
| 融化液(Reagent A) | 毫升 |
| 去脂液(Reagent B) | 毫升 |
| 清理液(Reagent C) | 毫升 |
| 结合液(Reagent D) | 毫升 |
| 酸性液(Reagent E) | 毫升 |
| 酶解液(Reagent F) | 毫升 |
| 缓冲液(Reagent G) | 毫升 |
| 催化液(Reagent H) | 毫升 |
| 标准液(Reagent I) | 微升 |
| 产品说明书 | 1 份 |
| 保存方式 |
|
保存 清理液(Reagent C)、结合液(Reagent D)、酶解液(Reagent F)和 催化液(Reagent H) 在-20℃冰箱里, 其余的保存在 4℃冰箱里; 缓冲液(Reagent G)、 催化液(Reagent H)和 标准液(Reagent I)避免光照;有效保证 6 月
用户自备
1.5 毫升离心管:用于标准样品处理和检测反应操作的容器
2 毫升离心管:用于直链淀粉样品处理的容器
15 毫升锥形离心管:用于样品处理的容器
50 毫升锥形离心管:用于样品预处理的容器
电热炉:用于样品煮沸处理
涡旋震荡仪:用于样本混匀
(微型)台式离心机:用于样品沉淀
恒温水槽或培养箱:用于样品反应孵育
比色皿:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
实验步骤
实验开始前, 将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化, 催化液(Reagent H) 避免光 照。同时设定好分光光度仪:波长 510nm ,并置零。然后进行下列操作。
一、 样品准备
1 . 精确秤取 25 毫克淀粉样品到 15 毫升锥形离心管
2 . 加入 xx 毫升 融化液(Reagent A)
3 . 温和涡旋震荡 1 分钟
4 . 煮沸 15 分钟, 其间每隔 3 分钟强力涡旋震荡 15 秒(注意:确保内容物均匀分布)
5 . 室温下,静置 5 分钟
6 . 加入 xx 毫升 去脂液(Reagent B)
7 . 强力涡旋震荡 1 分钟
8 . 加入 xx 毫升 去脂液(Reagent B)
9 . 上下倾倒混匀数次
10.室温下,静置 30 分钟(注意: 可见沉淀出现)
11.放进台式离心机离心 5 分钟,速度为 2000g
12.小心抽去上清液
13.空气中晾干
14.加入 xx 毫升 融化液(Reagent A)
15.温和涡旋震荡 1 分钟
16.煮沸 15 分钟, 其间每隔 3 分钟强力涡旋震荡 15 秒(注意:确保内容物均匀分布)
17.即刻加入 xx 毫升 清理液(Reagent C)
18.温和涡旋震荡 1 分钟
19.转移到 50 毫升锥形离心管
20.加入 xx 毫升 清理液(Reagent C) 清洗 15 毫升锥形离心管
21.转移清洗残留物合并到上述 50 毫升锥形离心管
22.重复实验步骤 20 至 21 一次
23.加入 xx 毫升 清理液(Reagent C),混匀(注意: 总共25 毫升成为1 毫克/毫升样品; 须即 刻使用,不能保存)
24.移取 1 毫升到新的 2 毫升离心管
25.加入 xx 毫升 结合液(Reagent D)
26.上下倾倒混匀数次
27.室温下静置 60 分钟
28.放进微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 16000g (或 13000RPM,例如 eppendorf 5415)
29.小心移取 1 毫升上清液到 15 毫升锥形离心管(注意: 须2 小时内使用,不能保存)
30.加入 xx 毫升 酸性液(Reagent E),混匀
31.煮沸 5 分钟
32.放进 40℃恒温水槽孵育 5 分钟
33.加入 xx 微升 酶解液(Reagent F)
34.放进 40℃恒温水槽孵育 30 分钟
35.放进台式离心机离心 5 分钟,速度为 2000g
36.移取上清液到新的 15 毫升离心管
37.置于室温下备用
二、标准液制备
1 . 准备 5 管 1.5 毫升离心管,标记为 A 至 E 号管
2 . 按下表分别加入试剂 ,混匀
| 管号 | 酸性液 (Reagent E) | 标准液 (Reagent I) | 测定体系 标准淀粉含量 |
| A | 微升 | 微升 | 微克 |
| B | 微升 | 微升 | 微克 |
| C | 微升 | 微升 | 微克 |
| D | 微升 | 微升 | 微克 |
| E | 微升 | 0 | 空对照 |
3. 分别加入 xx 微升 酶解液(Reagent F)
4. 放进 40℃恒温水槽孵育 10 分钟
5. 放进台式离心机离心 5 分钟,速度为 2000g
6. 分别移取上清液到新的 1.5 毫升离心管
7. 置于室温下备用
三、比色测定
1. 准备 6 个 1.5 毫升离心管,分别标记为: 5 个标准样(包括空对照)和待测直链淀粉
2. 分别加入 xx 微升 缓冲液(Reagent G) 到每个离心管
3. 分别加入 xx 微升上述制备的稀释的 标准液(Reagent I) 到标准样管
4. 加入 200 微升上述制备的直链淀粉样品到直链淀粉管
5. 分别加入 xx 微升 催化液(Reagent H) 到所有离心管,混匀
6. 放进 40℃恒温水槽或培养箱孵育 20 分钟, 避免光照
7. 转移到比色皿
8. 即刻放进分光光度仪检测:波长 510nm
9. 获得相应吸光读数:样品读数-背景空对照读数
四、 计算直链淀粉浓度
1 . 构建测定体系淀粉含量标准曲线:纵座标(Y)为标准样品吸光值 OD510 读数,横座标(X)为对应 的直链淀粉含量(微克)
2 . 根据标准曲线获得样品对应直链淀粉含量
3 . 计算样品实际直链淀粉含量
[根据标准曲线获得样品对应直链淀粉含量(微克) ÷xx (体系样品容量; 毫升) ]X xx (稀释倍数) =微克 /毫升÷1毫克/毫升(样品浓度)=微克淀粉/毫克样品
注意事项
1 . 本产品为 15 次(10 个样本)操作,包括标准测定
2 . 操作时,须戴手套
3 . 样品制备后,须在 2 小时内检测,不宜保存
4 . 系统操作过程中,标准测定只需 1 次
5 . 背景空对照小于 0.05 为理想状态
6 . 孵育时,避免光照
7 . 比色测定后,比色皿须清洗彻底
8 . 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
9 . 本公司提供系列淀粉检测试剂产品
质量标准
1 . 本产品经鉴定性能稳定
2 . 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK , RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
| G&VS19010. 1. 1 | 通用型直链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19010. 1. 1A | 融化液(Reagent A) | 100 毫升 |
| G&VS19010. 1. 1B | 去脂液(Reagent B) | 100 毫升 |
| G&VS19010. 1. 1C | 清理液(Reagent C) | 500 毫升 |
| G&VS19010. 1. 1D | 结合液(Reagent D) | 100 毫升 |
| G&VS19010. 1. 1E | 酸性液(Reagent E) | 100 毫升 |
| G&VS19010. 1. 1F | 酶解液(Reagent F) | 10 毫升 |
| G&VS19010. 1. 1G | 缓冲液(Reagent G) | 100 毫升 |
| G&VS19010. 1. 1H | 催化液(Reagent H) | 10 毫升 |
| G&VS19010. 1. 1I | 标准液(Reagent I) | 5 毫升 |
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19010. 1. 1 | 通用型直链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19010. 1.2 | 食物直链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19010. 1.3 | 植物直链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19010.2. 1 | 通用型支链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19010.2.2 | 食物支链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19010.2.3 | 植物支链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19010.3. 1 | 通用型总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19010.3.2 | 食物总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19010.3.3 | 植物总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
上海极威生物科技有限公司 公司地址:上海市崇明县长兴镇潘园公路1800号2号楼9703室
邮箱:435399850@qq.com 电话:021-80186165 手机:16602115336
备案号:沪ICP备15046135号-7


