当前位置：首页>技术专栏
发布时间：2026/11/4 15:35:40 阅读次数：4
细胞培养基乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
细胞培养基乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂是一种旨在通过乳糖酶、己糖激酶和葡萄糖6-磷酸脱氢酶的酶连续反应系统中，伴随的氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）还原反应后吸光峰值的变化，即采用光谱法来测定样品中乳糖含量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体细胞培养上清样品中乳糖含量的检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景
乳糖（lactose；milk sugar），又称为β-D-吡喃半乳糖基-β-D-吡喃葡萄糖（β-D-galactopyranosyl-(1↔4) β-D-glucopyranose）和蔗糖、麦芽糖一样是一种自然产生的二糖，由1个半乳糖分子和1个葡萄糖分子通过α1，4-糖苷键链接而成。其分子式为C12H22O11，分子量是342.3。牛奶中2至8%是乳糖成分。人体小肠分泌一种半乳糖苷酶（β-D-galactosidase）或乳糖酶（lactase），切离乳糖为半乳糖和葡萄糖，而被肠道消化吸收。乳糖忍耐性缺失的人，对于乳糖会产生各种消化道症状。婴儿半乳糖苷酶缺失，将导致半乳糖血症（galactosemia），引起肝肿大、肾衰、白内障和脑损伤等。乳糖也是许多面粉类食品的主要元素，包括蛋糕、饼干、面包等。基于底物乳糖，在乳糖酶（lactase）或α葡萄糖苷酶（β-D-galactosidase）的水解下，产生葡萄糖和半乳糖，继而在己糖激酶的作用下，产生葡萄糖-6-磷酸产物后，通过葡萄糖6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase；G6PDH）反应系统中，伴随的氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADP）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADPH），其吸光峰值的变化（340nm），来定量分析乳糖的含量。其反应方式为：
产品内容
缓冲液（Reagent A） 毫升
酶解液（Reagent B） 毫升
反应液（Reagent C） 毫升
底物液（Reagent D） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里；底物液（Reagent D）避免光照；有效保证6月
用户自备
无离子水：用于稀释样品
过滤纸：用于样品澄清处理
15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器
台式离心机：用于样品操作
培养箱：用于反应孵育
比色皿或酶标板：用于光谱测定的容器
分光光度仪或酶标仪：用于光谱测定分析
实验步骤
一、 （选择操作）样品准备（注意：参见注意事项6）
1． 移取5毫升待测细胞培养基到15毫升锥形离心管
2． 放进台式离心机离心10分钟，速度为1500g
3． 移取上清液到新的15毫升锥形离心管
4． （选择步骤）可以加入适量的用户自备的无离子水稀释（如果乳糖浓度过高）
5． （选择步骤）过滤纸过滤（如果离心处理，样品仍然不清澈）
6． 置于冰槽里备用或放进-20冰箱里保存
二、 测定准备
1. 开启并设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长340nm，并置零
2. 从－20℃冰箱里取出试剂，置于冰槽里融化；底物液（Reagent D）避免光照
三、 样品背景对照测定
1． 加入50微升待测样品到新的比色皿
2． 加入xx微升缓冲液（Reagent A）
3． 在50℃温度下孵育20分钟
4． 室温下静置10分钟
5． 加入xx微升缓冲液（Reagent A）
6． 加入xx微升反应液（Reagent C）
7． 加入xx微升底物液（Reagent D）
8． 上下倾倒数次，混匀
9． 在25℃温度下孵育5分钟
10． 即刻放进分光光度仪检测，此为样品背景对照
四、 样品测定
1． 加入50微升待测样品到新的比色皿
2． 加入xx微升酶解液（Reagent B），混匀
3． 在50℃温度下孵育20分钟
4． 室温下静置10分钟
5． 加入xx微升缓冲液（Reagent A）
6． 加入xx微升反应液（Reagent C）
7． 加入xx微升底物液（Reagent D）
8． 上下倾倒数次，混匀
9． 在25℃温度下孵育5分钟
10． 即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数
五、计算样品浓度
六、 96孔板测定
1． 在96孔板上做好相应标记：样品背景对照和待测样品
2． 分别移取10微升待测样品到所有孔里
3． 加入xx微升酶解液（Reagent B）到待测样品孔里
4． 加入xx微升缓冲液（Reagent A）到样品背景对照孔里
5． 轻轻摇动96孔板
6． 在50℃温度下孵育20分钟
7． 室温下静置10分钟
8． 分别加入xx微升缓冲液（Reagent A）到所有孔里
9． 分别加入xx微升反应液（Reagent C）
10． 分别加入xx微升底物液（Reagent D）
11． 轻轻摇动96孔板
12． 在25℃温度下孵育5分钟
13． 即刻放进酶标仪检测
14． 浓度计算
注意事项
1． 本产品为20次（比色皿）和80次（96孔板）操作
2． 本产品检测范围为1至80微克/毫升
3． 操作时，须戴手套
4． 建议使用比色皿测定
5． 样品须澄清，至关重要
6． 建议样品须澄清（去色、去脂、去蛋白、去气体等）；本公司提供乳糖待测样品处理试剂盒－G&VS19042.7
7． 光谱测定后，比色皿须清洗彻底
8． 测定值由低到高变化，表明样品乳糖阳性
9． 反应5分钟后光谱测定值趋于稳定；如果仍有波动，建议适当延长检测时间，直至读数稳定
10． 如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度
11． 本公司提供系列乳糖检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS19042.4 细胞培养基乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 20次
G&VS19042.4A 缓冲液（Reagent A） 100毫升
G&VS19042.4B 酶解液（Reagent B） 10毫升
G&VS19042.4C 反应液（Reagent C） 10毫升
G&VS19042.4D 底物液（Reagent D） 10毫升
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19042.1 | 糖类乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19042.2 | 乳制品乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19042.3 | 食物乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19042.4 | 细胞培养基乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19042.5 | 血液乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19042.6 | 体液乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19042.7 | 乳糖待测样品处理试剂盒 | 20次 |
上海极威生物科技有限公司 公司地址:上海市崇明县长兴镇潘园公路1800号2号楼9703室
邮箱：435399850@qq.com 电话：021-80186165 手机：16602115336
备案号：沪ICP备15046135号-7
