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谷类麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/11/4 15:52:48      阅读次数:5

 

谷类麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

谷类麦芽糖含量酶连续反光度法定量检测试剂是一种旨在通过麦芽糖酶、己糖激酶和葡萄糖6-磷酸脱氢酶的酶连续反应系统中,伴随的氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)还原反应后吸光峰值的变化,即采用光度法来测定谷类样品中麦芽糖含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种谷类作物包括水稻、玉米、小麦、大麦、黑麦、高粱、燕麦和小米等组织样品中麦芽糖含量的检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

 

技术背景

麦芽糖(maltose;malt sugar)是一种二糖,由2个葡萄糖分子通过α1,4-糖苷键链接而成。其分子式为C12H22O11,分子量是342.3。酵母发酵的麦芽糖代谢将产生乙醇和二氧化碳。麦芽糖是产生能源分子ATP的主要原料,广泛存在于各种植物和食物中,包括蜂蜜、面粉类食品、巧克力等。基于底物麦芽糖,在麦芽糖酶(maltase)或α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)的水解下,产生2个分子葡萄糖,继而在己糖激酶的作用下,产生葡萄糖-6-磷酸产物后,通过葡萄糖6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase;G6PDH)反应系统中,氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(oxidized  nicotinamide adenine dinucleotide phosphate;NADP)转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate;NADPH),其吸光峰值的变化(340nm),来定量分析麦芽糖的含量。其反应方式为:

 

产品内容

裂解液(Reagent A)  毫升

缓冲液(Reagent B)  毫升

酶解液(Reagent C)  毫升

反应液(Reagent D)  毫升

底物液(Reagent E)   毫升

产品说明书        1份

 

保存方式

保存在-20℃冰箱里;底物液(Reagent E)避免光照;有效保证6月

 

用户自备

无离子水:用于稀释样品

尼龙网:用于样品澄清处理

15毫升锥形离心管:用于样品制备的容器

1.5毫升离心管:用于样品保存的容器

DOUNCE匀浆器:用于裂解组织细胞

(微型)台式离心机:用于样品操作

比色皿或96孔板:用于光度测定的容器

分光光度仪或酶标仪:用于光度测定分析

 

实验步骤

一、 (选择操作)样品准备(注意:参见注意事项6)

1. 准备好新鲜的谷类作物组织,并秤重以确定组织重量200毫克 

2. 移入到一个液氮冻存管

3. 即刻放进液氮罐过夜

4. 次日从液氮罐里取出,即刻(最快速度)用研磨棒碾碎组织成粉末状(注意:切莫使组织冻融)

5. 放进一个15毫升锥形离心管

6. 加入预冷的xx微升裂解液(Reagent A)

7. 涡旋震荡5秒,充分混匀

8. 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器

9. 在冰槽里用研磨棒匀化组织(约80下) 

10. 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管

11. 放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为1500g(或5000RPM,例如eppendorf 5415)

12. 小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管

13. (选择步骤)可以加入适量的用户自备的无离子水稀释(如果样品浓度过高)

14. (选择步骤)60微米尼龙网过滤(如果离心处理,样品仍然不清澈)

15. 置于冰槽里备用或放进-20冰箱里保存

 

二、 测定准备

1. 开启并设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,并置零 

2. 从-20℃冰箱里取出试剂,置于冰槽里融化;底物液(Reagent E)避免光照

3. 缓冲液(Reagent B)室温下均衡温度

 

三、 样品背景对照测定

1. 移取xx微升缓冲液(Reagent B)到新的比色皿

2. 加入50微升待测样品

3. 加入xx微升反应液(Reagent D)

4. 加入xx微升底物液(Reagent E)

5. 上下倾倒数次,混匀

6. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品背景对照0分钟读数

7. 在25℃温度下孵育5分钟

8. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品背景对照5分钟读数

9. 样品背景对照实际读数:5分钟读数—0分钟读数

 

四、 样品测定

1. 移取50微升待测样品到新的比色皿

2. 加入xx微升酶解液(Reagent C),混匀

3. 在25℃温度下孵育20分钟

4. 移取xx微升缓冲液(Reagent B)

5. 加入xx微升反应液(Reagent D)

6. 加入xx微升底物液(Reagent E)

7. 上下倾倒数次,混匀

8. 即刻放进分光光度仪检测,此为待测样品0分钟读数

9. 在25℃温度下孵育5分钟

10. 即刻放进分光光度仪检测,此为待测样品5分钟读数 

11. 待测样品实际读数:5分钟读数—0分钟读数

 

五、计算样品浓度

 

六、 酶标仪测定

1. 在96孔板上做好相应标记:样品背景对照和待测样品

2. 分别移取10微升待测样品到所有孔里

3. 加入xx微升酶解液(Reagent C)到待测样品孔里

4. 加入xx微升缓冲液(Reagent B)到样品背景对照孔里

5. 轻轻摇动96孔板

6. 在25℃温度下孵育20分钟

7. 分别加入xx微升缓冲液(Reagent B)到所有孔里

8. 分别加入xx微升反应液(Reagent D)

9. 分别加入xx微升底物液(Reagent E)

10. 轻轻摇动96孔板

11. 即刻放进酶标仪检测,此为0分钟读数

12. 在25℃温度下孵育5分钟

13. 即刻放进酶标仪检测 ,此为5分钟读数

14. 实际读数:5分钟读数—0分钟读数

15. 浓度计算

 

注意事项

1. 本产品为20次(比色皿)和80次(96孔板)操作

2. 本产品检测范围为1至80微克/毫升(250微摩尔/升)

3. 操作时,须戴手套

4. 建议使用比色皿测定

5. 样品须澄清,至关重要 

6. 建议样品须澄清(去色、去脂、去蛋白、去气体等);本公司提供麦芽糖待测样品处理试剂盒-G&VS19048.9

7. 光度测定后,比色皿须清洗彻底

8. 测定值由低到高变化,表明样品麦芽糖阳性

9. 反应5分钟后光度测定值趋于稳定;如果仍有波动,建议适当延长检测时间,直至读数稳定

10. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度

11. 本公司提供系列麦芽糖检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

单组分订购信息

编号               名称                    规格

G&VS19048.3     谷类麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒   20次

G&VS19048.3A    裂解液(Reagent A)                     毫升

G&VS19048.3B    缓冲液(Reagent B)                       毫升

G&VS19048.3C     酶解液(Reagent C)                      毫升

G&VS19048.3D     反应液(Reagent D)                      毫升

G&VS19048.3E     底物液(Reagent E)                    毫升

 

试剂盒订购信息 

产品编号

名称

规格

G&VS19048.1

食物麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒

20次

G&VS19048.2

植物麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒

20次

G&VS19048.3

谷类麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒

20次

G&VS19048.4

饼干麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒

20次

G&VS19048.5

糖浆麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒

20次

G&VS19048.6

血液麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒

20次

G&VS19048.7

体液麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒

20次

G&VS19048.8

细胞培养上清麦芽糖含量酶连续反应光度法定量检测试剂盒

20次

G&VS19048.9

麦芽糖待测样品处理试剂盒

20次

 


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