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发布时间:2026/11/4 16:32:38 阅读次数:4
细胞培养基D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
细胞培养基D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂是一种旨在通过葡萄糖氧化酶和过氧化物酶耦联反应系统,测定样品中的葡萄糖氧化后产物,转化为有色醌亚胺,即采用比色法测算细胞培养上清样品中葡萄糖含量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体细胞培养液或发酵液葡萄糖含量的检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
葡萄糖(glucose),又称为单糖(monosaccharide或simple sugar),是重要的碳水化合物,作为活细胞生命的能源和代谢中间产物,是细胞呼吸代谢和光合成的主要产物之一。其分子式为C6H12O6,含有6个碳原子。D型葡萄糖具有生物学活性,又称为dextrose。人体血液中葡萄糖的水平与体内代谢调节正常与否有关。使用氧化技术,即葡萄糖氧化酶和过氧化物酶耦联反应(glucose oxidase/peroxidase;GOPOD),检测体液、食物、以及植物中葡萄糖浓度,可以避免过高或过低定量的缺陷。基于葡萄糖在葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)作用下,产生葡萄糖酸(gluconate)和过氧化氢,继而与4-氨基安替比林(4-aminoantipyrine; 4-AA)反应,过氧化物酶(peroxidase)帮助生成红色的有色醌亚胺(quinoneimine dye),在分光光度仪(510nm 波长)下,定量测定样品中葡萄糖的含量。其酶耦联反应方式为:
产品内容
缓冲液(Reagent A) 毫升
底物液(Reagent B) 毫升
反应液(Reagent C) 微升
阴性液(Reagent D) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存底物液(Reagent B)和反应液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(Reagent B)避免光照,有效保证6月
用户自备
无离子水:用于稀释样品
过滤纸:用于样品澄清处理
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
台式离心机:用于样品操作
培养箱:用于反应孵育
比色皿或96孔板:用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪:用于比色分析
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化,底物液(Reagent B)避免光照。同时设定好分光光度仪:波长510nm,并置零。然后进行下列操作。
一、 (选择操作)样品准备(注意:参见注意事项5)
1. 移取5毫升待测细胞培养基到15毫升锥形离心管
2. 放进台式离心机离心10分钟,速度为1500g
3. 移取上清液到新的15毫升锥形离心管
4. (选择步骤)可以加入适量的用户自备的无离子水稀释(如果葡萄糖浓度过高)
5. (选择步骤)过滤纸过滤(如果离心处理,样品仍然不清澈)
6. 置于冰槽里备用或放进-20℃冰箱里保存
二、 背景对照测定
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿
2. 加入xx微升底物液(Reagent B)
3. 加入xx微升反应液(Reagent C)
4. 放进40℃培养箱里孵育3分钟,避免光照
5. 加入xx微升阴性液(Reagent D)
6. 上下倾倒数次,混匀
7. 放进40℃培养箱里孵育20分钟,避免光照
8. 即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照
三、 样品测定
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿
2. 加入xx微升底物液(Reagent B)
3. 加入xx微升反应液(Reagent C)
4. 放进40℃培养箱里孵育3分钟,避免光照
5. 加入100微升上述制备的待测样品(注意:样品须清澈)
6. 上下倾倒数次,混匀
7. 放进40℃培养箱里孵育20分钟,避免光照
8. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数
四、 计算样品浓度
五、 酶标仪测定
1. 在96孔孔板上做好相应标记:背景对照和样品
2. 分别移取xx微升缓冲液(Reagent A)到相应孔里
3. 分别加入xx微升底物液(Reagent B)
4. 分别加入xx微升反应液(Reagent C)
5. 放进40℃培养箱里3分钟,避免光照
6. 分别加入xx微升阴性液(Reagent D)或待测样品(注意:样品须清澈)
7. 轻轻摇动96孔板
8. 放进40℃培养箱里20分钟,避免光照
9. 即刻放进酶标仪测读
10. 浓度计算:
注意事项
1. 本产品为20次(比色皿)和80次(96孔板)操作,包括背景对照
2. 本产品检测范围为1至100微克/毫升
3. 建议使用比色皿检测
4. 操作时,须戴手套
5. 建议样品须澄清(去色、去脂、去蛋白、去气体等);本公司提供葡萄糖待测样品处理试剂盒-G&VS19031.12
6. 使用高糖细胞培养基,例如Ham F-12和RPMI 1640,建议稀释20倍后测定
7. 使用发酵液,建议90℃温度下孵育10分钟预处理
8. 系统操作过程中,背景测定只需1次
9. 样品须澄清,至关重要
10. 测定值由低到高变化,表明样品葡萄糖阳性
11. 比色测定后,比色皿须清洗彻底
12. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
13. 本公司提供系列葡萄糖检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组份订购信息
编号 名称 规格
G&VS19031.10 细胞培养基D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 20/80次
G&VS19031.10A 缓冲液(Reagent A) 毫升
G&VS19031.10B 底物液(Reagent B) 毫升
G&VS19031.10C 反应液(Reagent C) 毫升
G&VS19031.10D 阴性液(Reagent D) 毫升
G&VS19031.12 葡萄糖待测样品处理试剂盒 20次
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19031.1 | 果菜D-葡萄糖含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.2 | 乳品D-葡萄糖含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.3 | 食物D-葡萄糖含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.4 | 糖果D-葡萄糖含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.5 | 细胞培养基D-葡萄糖含量激酶法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.6 | 果菜D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.7 | 乳品D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.8 | 食物D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.9 | 糖果D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.10 | 细胞培养基D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.11 | 体液D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19031.12 | 葡萄糖待测样品处理试剂盒 | 20次 |
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