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细胞培养基D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/11/4 16:34:26      阅读次数:4

 

细胞培养基D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

细胞培养基D-葡萄糖激酶法定量检测试剂是一种旨在通过己糖激酶和葡萄糖6-磷酸脱氢酶的酶偶联反应系统下,伴随的氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)还原反应后吸光峰值的变化,即采用光度法来测定细胞培养上清样品中葡萄糖含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体细胞培养液葡萄糖含量的检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。 

 

技术背景

葡萄糖(glucose),又称为单糖(monosaccharide或simple sugar),是重要的碳水化合物,作为活细胞生命的能源和代谢中间产物,是细胞呼吸代谢和光合成的主要产物之一。其分子式为C6H12O6,含有6个碳原子。D型葡萄糖具有生物学活性,又称为dextrose。葡萄糖以游离糖、二糖或多糖形式,广泛存在于各种植物和食物中,包括蜂蜜、酒类、面粉类食品、巧克力等。人体血液中葡萄糖的水平与体内代谢调节正常与否有关。基于底物葡萄糖,在己糖激酶的作用下,产生葡萄糖-6-磷酸产物后,通过葡萄糖6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase;G6PDH)反应系统中,氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(oxidized  nicotinamide adenine dinucleotide phosphate;NADP)转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate;NADPH),其峰值的变化(340nm),来定量分析葡萄糖的含量。其反应方式为:

 

产品内容

缓冲液(Reagent A)   毫升

反应液(Reagent B)   毫升

底物液(Reagent C)   毫升

阴性液(Reagent D)   毫升

产品说明书         1份

 

保存方式

保存在-20℃冰箱里;反应液(Reagent B)和底物液(Reagent C)避免光照;有效保证6月

 

用户自备

无离子水:用于稀释样品

过滤纸:用于样品澄清处理

15毫升锥形离心管:用于样品制备的容器

台式离心机:用于样品操作

比色皿或96孔板:用于光度分析的容器

分光光度仪或酶标仪:用于光度分析

 

实验步骤

一、 (选择操作)样品准备(注意:参见注意事项7)

1. 移取5毫升待测细胞培养基到15毫升锥形离心管

2. 放进台式离心机离心10分钟,速度为1500g

3. 移取上清液到新的15毫升锥形离心管

4. (选择步骤)可以加入适量的用户自备的无离子水稀释(如果葡萄糖浓度过高)

5. (选择步骤)过滤纸过滤(如果离心处理,样品仍然不清澈)

6. 置于冰槽里备用或放进-20冰箱里保存

 

二、 测定准备

1. 开启并设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,并置零 

2. 从-20℃冰箱里取出试剂,置于冰槽里融化;反应液(Reagent B)避免光照

3. 缓冲液(Reagent A)室温下均衡温度

 

三、 背景对照测定

1. 移取xx微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿

2. 加入xx微升阴性液(Reagent D)

3. 加入xx微升反应液(Reagent B)

4. 加入xx微升底物液(Reagent C)

5. 上下倾倒数次,混匀

6. 在25℃温度下孵育5分钟

7. 即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照 

 

四、 样品测定

1. 移取xx微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿

2. 加入50微升待测样品(50微克蛋白)(注意:样品须清澈)

3. 加入xx微升反应液(Reagent B)

4. 加入xx微升底物液(Reagent C)

5. 上下倾倒数次,混匀

6. 在25℃温度下孵育5分钟

7. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数 

 

五、计算样品活性

 

六、 酶标仪测定

1. 在96孔孔板上做好相应标记:背景对照和样品

2. 分别移取xx微升缓冲液(Reagent A)到96孔板中的所有孔里

3. 分别加入xx微升阴性液(Reagent D)或待测样品到相应孔里(注意:样品须清澈)

4. 分别加入xx微升反应液(Reagent B)

5. 分别加入xx微升底物液(Reagent C)

6. 轻轻摇动96孔板

7. 在25℃温度下孵育5分钟

8. 即刻放进酶标仪检测 

9. 活性计算

 

注意事项

1. 本产品为20次(比色皿)和80次(96孔板)操作,包括背景对照

2. 本产品检测范围为1至80微克/毫升

3. 操作时,须戴手套

4. 系统操作过程中,背景测定只需1次

5. 建议使用比色皿测定

6. 样品须澄清,至关重要 

7. 建议样品须澄清(去色、去脂、去蛋白、去气体等);本公司提供葡萄糖待测样品处理试剂盒-G&VS19031.12

8. 使用高糖细胞培养基,例如Ham F-12和RPMI 1640,建议稀释20倍后测定

9. 光度测定后,比色皿须清洗彻底

10. 测定值由低到高变化,表明样品葡萄糖阳性

11. 反应5分钟后光度测定值趋于稳定;如果仍有波动,建议适当延长检测时间,直至读数稳定

12. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度

13. 本公司提供系列葡萄糖检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

单组份订购信息

编号             名称                   规格

G&VS19031.5    细胞培养基D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒    20次

G&VS19031.5A   缓冲液(Reagent A)                  毫升

G&VS19031.5B    反应液(Reagent B)                   毫升

G&VS19031.5C    底物液(Reagent C)                   毫升

G&VS19031.5D   阴性液(Reagent D)               毫升

 

试剂盒订购信息 

产品编号

名称

规格

G&VS19031.1

果菜D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.2

乳品D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.3

食物D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.4

糖果D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.5

细胞培养基D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.6

果菜D-葡萄糖氧化法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.7

乳品D-葡萄糖氧化法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.8

食物D-葡萄糖氧化法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.9

糖果D-葡萄糖氧化法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.10

细胞培养基D-葡萄糖氧化法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19031.11

体液D-葡萄糖氧化法定量检测试剂盒

20次

G&VS19031.12

葡萄糖待测样品处理试剂盒

20次

 


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