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植物果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/11/4 16:39:11      阅读次数:4

 

植物果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

植物果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂是一种旨在通过物理方法萃取处理, 进而使用生 物酶去除蔗糖,然后水解果聚糖分子为单体还原糖,在己糖激酶、葡萄糖磷酸异构酶和葡萄糖 6-磷酸脱氢 酶的酶连续循环反应系统下, 伴随的氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) 还原反应后峰值的变化, 即采 用比色法测算果聚糖总含量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。 其适用于各种植物样品中果聚糖的总含量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

技术背景

果聚糖(fructan) 是果糖基果糖分子的聚合体, 包括多聚体、微聚体、二糖和菊粉二糖(inulobiose)。果聚 糖广泛存在于植物中, 包括单子叶植物(monocotyledon)、双子叶植物(dicotyledon) 和蓝藻中, 尤其在蔬 菜类植物中, 例如朝鲜蓟(Artichokes)、芦笋(asparagus)、青刀豆(greenbeans)、大葱(Leek)等含量明 显。果聚糖分成三种: 菊糖(Inulin)由β  (2→ 1) 糖苷键(glycosidic bond) 线性链接果糖分子而成; 左聚 糖(levan/phlein)  由β  (2→6)糖苷键线性链接果糖分子而成; Graminan果聚糖由β  (2→ 1)和β  (2→6) 糖苷键分叉链接果糖分子而成。果聚糖具有抗冻特性,是植物在低温状态下生存利用的分子,同时帮助细 胞保持完整。果聚糖不能在人体肠道内分解消化。基于果聚糖样品在物理方法下萃取后,首先在蔗糖酶   (sucrase ) 催化下, 产生还原性单体葡萄糖和果糖, 通过碱性硼氢化盐(alkaline borohydride) 结合后予以 清除蔗糖的干扰; 然后果聚糖成分在菊粉酶(inulinase) 的催化下, 产生还原性单体葡萄糖和果糖, 进而通 过己糖激酶(hexokinase;HK)、葡萄糖磷酸异构酶(phosphoglucoisomerase;PGI)和葡萄糖6-磷酸脱氢酶

(glucose-6-phosphate dehydrogenase;G6PDH)反应系统中,氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidized        nicotinamide adenine dinucleotide;NAD) 转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH),其峰值的变化(340nm),来定量分析还原性糖浓度,间接分析样品中果聚糖的含 量,其反应方式为:

 

产品内容

酶解液(Reagent A)

去干扰液(Reagent B)

酸性液(Reagent C)

催化液(Reagent D)

缓冲液(Reagent E)

反应液(Reagent F)

底物液(Reagent G)

产品说明书

 

保存方式

 

保存 酸性液(Reagent C)和 缓冲液(Reagent E)在 4℃冰箱里,其余的保存在-20℃ 冰箱里; 底物液(Reagent G)避免光照;有效保证 6 月


用户自备

无离子水:用于样品溶解

1.5 毫升离心管:用于样品处理的容器

50 毫升锥形离心管:用于样品预处理的容器

涡旋震荡仪:用于样本混匀

漏斗和滤纸:用于样品过滤

恒温水槽或培养箱:用于样品制备和反应孵育

比色皿:用于比色的容器

分光光度仪:用于比色分析

 

实验步骤

实验开始前, 将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化, 底物液(Reagent G) 避免光 照。同时设定好分光光度仪:波长 340nm ,并置零。然后进行下列操作。

一、  果聚糖样品萃取

1 .  精确秤取 1 克植物样品

2 .  室温下,切碎或研磨成粉末状

3 .  转移到到 50 毫升锥形离心管

4 .  加入 40 毫升用户自备的 80℃预热的无离子水

5 .  涡旋震荡 1 分钟

6 .  放进 80℃恒温水槽孵育 15 分钟

7 .  其间每隔 5 分钟涡旋震荡 1 分钟

8 .  放进 25℃恒温水槽孵育 15 分钟或置于室温下冷却

9 .  准备 1 个小型漏斗,内置滤纸,架于新的 50 毫升锥形离心管

10.过滤样品

11.保存果聚糖萃取样品在 40℃培养箱里或恒温水槽里备用

 

二、  果聚糖样品纯化

1.      移取 200 微升上述制备的样本到 1.5 毫升离心管

2.      加入    微升 酶解液(Reagent A),混匀

3.      放进 40℃恒温水槽孵育 30 分钟

4.      加入    微升 去干扰液(Reagent B),混匀

5.      涡旋震荡 15 秒

6.      放进 40℃恒温水槽孵育 30 分钟

7.      加入    微升 酸性液(Reagent C)

8.      涡旋震荡 15 秒

9.      保存果聚糖纯化样品在 40℃培养箱里或恒温水槽里备用

 

三、  比色测定

 

1.      移取 100 微升上述纯化果聚糖样品到 2 个新的比色皿,标记为背景对照和待测样品

2.      加入    微升 催化液(Reagent D) 到待测样品里

3.      加入    微升 酸性液(Reagent C) 到背景对照里

4.      放进 40℃恒温水槽孵育 20 分钟

5.      室温下静置 15 分钟

6.      分别加入    微升 缓冲液(Reagent E)

7.      分别加入    微升 反应液(Reagent F)

8.      分别加入    微升 底物液(Reagent G)

9.      上下倾倒数次,混匀

10.    在 25℃恒温水槽孵育 15 分钟,避免光照

11.    即刻放进分光光度仪检测:波长 340nm

12.    获得相应吸光读数

 

四、  果聚糖浓度计算

 

注意事项

1 .  本产品为 20 次操作,包括背景测定

2 .  操作时,须戴手套

3 .  试剂具有腐蚀性,注意操作安全

4 .  样品制备后,建议在 2 小时内检测;如果日后检测,保存在-20℃冰箱里,样品会产生沉淀,检测前, 须在 80℃恒温水槽孵育 15 分钟,然后置于 40℃恒温水槽备用

5 .  系统操作过程中,背景测定只需 1 次

6 .  比色测定孵育时,避免光照

7 .  比色测定后,比色皿须清洗彻底

8 .  如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品容量,但注意计算公式调整

9 .  本公司提供系列果聚糖检测试剂产品

 

质量标准

1 .  本产品经鉴定性能稳定

2 .  本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。


友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ,  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

 

编号

名称

规格

G&VS19024. 1

植物果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19024. 1A

酶解液(Reagent A)

10 毫升

G&VS19024. 1B

去干扰液(Reagent B)

10 毫升

G&VS19024. 1C

酸性液(Reagent C)

50 毫升

G&VS19024. 1D

催化液(Reagent D)

10 毫升

G&VS19024. 1E

缓冲液(Reagent E)

10 毫升

G&VS19024. 1F

反应液(Reagent F)

1 毫升

G&VS19024. 1G

底物液(Reagent G)

10 毫升

 

产品编号

名称

规格

G&VS19023. 1

植物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19023.2

食物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19023.3

蓝藻果聚糖化学比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19024. 1

植物果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19024.2

食物果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19024.3

蓝藻果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20 次

 


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