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植物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/11/4 16:40:14      阅读次数:4

 

植物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

植物果聚糖化学比色法定量检测试剂是一种旨在通过物理方法萃取处理,进而使用生物酶去除蔗糖,然后水解果聚糖分子为单体还原糖,在碱性条件下,与对羟基苯甲酸肼反应,其黄色复合物产物出现的峰值变化,即采用比色法测算果聚糖总含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种植物样品中果聚糖的总含量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

 

技术背景

果聚糖(fructan)是果糖基果糖分子的聚合体,包括多聚体、微聚体、二糖和菊粉二糖(inulobiose)。果聚糖广泛存在于植物中,包括单子叶植物(monocotyledon)、双子叶植物(dicotyledon)和蓝藻中,尤其在蔬菜类植物中,例如朝鲜蓟(Artichokes)、芦笋(asparagus)、青刀豆(green beans)、大葱(Leek)等含量明显。果聚糖分成三种:菊糖(Inulin)由β(2→1)糖苷键(glycosidic bond)线性链接果糖分子而成;左聚糖(levan/phlein) 由β(2→6)糖苷键线性链接果糖分子而成;Graminan果聚糖由β(2→1)和β(2→6)糖苷键分叉链接果糖分子而成。果聚糖具有抗冻特性,是植物在低温状态下生存利用的分子,同时帮助细胞保持完整。果聚糖不能在人体肠道内分解消化。基于果聚糖样品在物理方法下萃取后,首先在蔗糖酶(sucrase)催化下,产生还原性单体葡萄糖和果糖,通过碱性硼氢化盐(alkaline borohydride)结合后予以清除蔗糖的干扰;然后果聚糖成分在菊粉酶(inulinase)的催化下,产生还原性单体葡萄糖和果糖,进而在碱性条件下,与对羟基苯甲酸肼(p-Hydroxybenzoic acid hydrazide;PAHBAH)反应,产生黄色复合物,在分光光度仪下,测定其峰值的变化(410nm),来定量分析还原性糖浓度,间接分析样品中果聚糖的含量,其反应方式为:

     

产品内容

酶解液(Reagent A) XX毫升

去干扰液(Reagent B) XX毫升

酸性液(Reagent C)   XX毫升

催化液(Reagent D) XX毫升

缓冲液(Reagent E) XX毫升

反应液(Reagent F) XX毫升

标准液(Reagent G) XX毫升

产品说明书     1份

 

保存方式

保存酶解液(Reagent A)、去干扰液(Reagent B)和催化液(Reagent D)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;反应液(Reagent F)避免光照;有效保证6月

 

用户自备

无离子水:用于样品溶解

1.5毫升离心管:用于样品和标准品配制的容器

50毫升锥形离心管:用于样品预处理或工作液配制的容器

15毫升锥形离心管:用于工作液配制的容器

10毫升测试管:用于样品反应和比色的容器

电热炉:用于样品煮沸处理

涡旋震荡仪:用于样本混匀

漏斗和滤纸:用于样品过滤

恒温水槽或培养箱:用于样品制备和反应孵育

比色皿:用于比色的容器

分光光度仪:用于比色分析

 

实验步骤

一、样品准备

1、果聚糖样品萃取

1. 精确秤取1克植物样品

2. 室温下,切碎或研磨成粉末状

3. 转移到到50毫升锥形离心管

4. 加入40毫升用户自备的80℃预热的无离子水

5. 涡旋震荡1分钟

6. 放进80℃恒温水槽孵育15分钟

7. 其间每隔5分钟涡旋震荡1分钟

8. 放进25℃恒温水槽孵育15分钟或置于室温下冷却

9. 准备1个小型漏斗,内置滤纸,架于新的50毫升锥形离心管

10. 过滤样品

11. 保存果聚糖萃取样品在40℃培养箱里或恒温水槽里备用

 

2、果聚糖样品纯化

1. 移取200微升上述制备的样本到1.5毫升离心管

2. 加入XX微升酶解液(Reagent A),混匀

3. 放进40℃恒温水槽孵育30分钟

4. 加入XX微升去干扰液(Reagent B),混匀

5. 涡旋震荡15秒

6. 放进40℃恒温水槽孵育30分钟

7. 加入XX微升酸性液(Reagent C)

8. 涡旋震荡15秒

9. 保存果聚糖纯化样品在40℃培养箱里或恒温水槽里备用

 

二、标准样品制备

1. 准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至5号管

2. 分别加入XX微升酸性液(Reagent C)到1至5号管

3. 移取XX微升标准液(Reagent G)到1号管,混匀

4. 小心移取XX微升1号管稀释的标准液(Reagent G)到2号管,混匀

5. 小心移取XX微升2号管稀释的标准液(Reagent G)到3号管,混匀

6. 小心移取XX微升3号管稀释的标准液(Reagent G)到4号管,混匀

7. 将1至5号管放进冰槽里备用,避免光照;标准管浓度见下表

管号

酸性液(Reagent C)

标准液(Reagent G)

标准果糖浓度

1

XX微升

XX微升

XX毫克/毫升

2

XX微升

XX微升1号管

XX毫克/毫升

3

XX微升

XX微升2号管

XX毫克/毫升

4

XX微升

XX微升3号管

XX毫克/毫升

5

XX微升

0

0

 

三、标准样品测定

检测开始前,移取XX毫升反应液(Reagent F)到50毫升锥形离心管,加入XX毫升缓冲液(Reagent E),混匀,标记为反应工作液,置于冰槽里备用,避免光照。同时设定好分光光度仪:波长410nm,并置零。然后进行下列操作。

1. 移取XX微升上述配制的标准液(Reagent G)5个10毫升测试管

2. 分别加入XX微升酸性液(Reagent C)

3. 放进40℃恒温水槽孵育20分钟

4. 分别加入XX毫升反应工作液,混匀

5. 煮沸6分钟

6. 放进25℃恒温水槽孵育5分钟

7. 即刻放进分光光度仪检测:波长410nm

8. 获得相应吸光读数

9. 构建标准曲线:纵座标(Y轴)为吸光读数;横座标(X轴)为标准果糖浓度(毫克/毫升)

 

四、 样品测定

检测开始前,移取XX毫升反应液(Reagent F)到15毫升锥形离心管,加入XX毫升缓冲液(Reagent E),混匀,标记为反应工作液,置于冰槽里备用,避免光照。同时设定好分光光度仪:波长410nm,并置零。然后进行下列操作。

1. 移取200微升上述纯化果聚糖样品到10毫升测试管

2. 加入XX微升催化液(Reagent D)到待测样品里

3. 放进40℃恒温水槽孵育20分钟

4. 加入XX毫升反应工作液,混匀

5. 煮沸6分钟

6. 放进25℃恒温水槽孵育5分钟

7. 即刻放进分光光度仪检测:波长410nm

8. 获得相应吸光读数

9. 根据标准曲线获得样品对应果糖浓度

 

五、 果聚糖浓度计算

 

注意事项

1. 本产品为20次操作,包括背景测定

2. 操作时,须戴手套

3. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全

4. 样品制备后,建议在2小时内检测;如果日后检测,保存在-20℃冰箱里,样品会产生沉淀,检测前,须在80℃恒温水槽孵育15分钟,然后置于40℃恒温水槽备用

5. 系统操作过程中,背景测定只需1次

6. 反应工作液配制后,不宜保存,须在4小时内使用

7. 比色测定孵育时,避免光照

8. 比色测定后,比色皿须清洗彻底

9. 如果待测样品浓度过高或过低,可以稀释样品,但注意计算公式调整

10. 本公司提供系列果聚糖检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

单组份订购信息

编号               名称               规格

G&VS19023.1    植物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒   20次

G&VS19023.1A   酶解液(Reagent A)                 10毫升

G&VS19023.1B   去干扰液(Reagent B)                10毫升

G&VS19023.1C   酸性液(Reagent C)                  50毫升

G&VS19023.1D   催化液(Reagent D)              10毫升

G&VS19023.1E   缓冲液(Reagent E)              500毫升

G&VS19023.1F   反应液(Reagent F)                  100毫升

G&VS19023.1G   标准液(Reagent G)                  10毫升

 

试剂盒订购信息 

产品编号

名称

规格

G&VS19023.1

植物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19023.2

食物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19023.3

蓝藻果聚糖化学比色法定量检测试剂盒 

20次

G&VS19024.1

 植物果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19024.2

食物果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19024.3

蓝藻果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20次

 


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