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发布时间：2026/11/4 16:40:54 阅读次数：4
血液乙醇含量光度法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
血液乙醇含量光度法定量检测试剂是一种旨在通过乙醇脱氢酶和甲醛脱氢酶的酶偶联反应系统中，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的变化，即采用光度法测定其还原后峰值的变化，进行测算样品中乙醇含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体或动物血液，包括血浆、血清等样品中乙醇含量的检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景
乙醇普遍存在于自然界生态系统，尤其是各种食品中。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）是糖酵解通路中被氧化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide；NAD）而产生乙醇所必须的辅助因子，基于这一细胞生理学原理，通过乙醇脱氢酶（ethanol dehydrogenase）和甲醛脱氢酶（aldehyde dehydrogenase）反应体系，使乙醇氧化为乙醛，进一步氧化为乙酸，在这一过程中伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸生成量的变化，即测定NADH（340nm 波长）的浓度，来定量分析乙醇的含量。其反应方式为：
产品内容
缓冲液（Reagent A） 毫升
反应液（Reagent B） 毫升
阴性液（Reagent C） 毫升
酶促液I（Reagent D） 微升
酶促液II（Reagent E） 微升
预处理液（Reagent F） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存反应液（Reagent B）、酶促液I（Reagent D）和酶促液II（Reagent E）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
比色皿或96孔板：用于光度测定的容器
分光光度仪或酶标仪：用于光度分析
实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的反应液（Reagent B）、酶促液I（Reagent D）和酶促液II（Reagent E）置入冰槽里融化。同时设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长340nm，并置零。然后进行下列操作。
一、 样品准备（注意：参见注意事项6）
选择一：血浆样品
1． 准备好肝素或ACD抗凝管（注意：避免使用EDTA抗凝管）
2． 抽取1毫升血液，置于抗凝管里
3． 放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
4． 小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）
5． 移取500微升上述制备的血浆到新的1.5毫升离心管
6． 加入xx微升预处理液（Reagent F），混匀
7． 涡旋震荡15秒
8． 放在冰槽里待测
选择二：血清样品
1． 准备好不含抗凝剂的储存管
2． 抽取1毫升血液，置于储存管里
3． 室温下，静置30分钟，直至血液凝结
4． 放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为2000g（或5000RPM，例如eppendorf 5415）
5． 小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）
6． 移取500微升上述制备的血清到新的1.5毫升离心管
7． 加入xx微升预处理液（Reagent F），混匀
8． 涡旋震荡15秒
9． 放在冰槽里待测
二、 背景对照测定
1． 移取xx微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
2． 放进分光光度仪，置零
3． 取出比色皿，加入xx微升反应液（Reagent B）
4． 加入xx微升阴性液（Reagent C）
5． 加入xx微升酶促液I（Reagent D）
6． 上下倾倒数次，混匀
7． 室温下（温度为25℃）静置2分钟，避免光照
8． 即刻放进分光光度仪测读（此为初始读数）
9． 加入xx微升酶促液II（Reagent E）
10． 上下倾倒数次，混匀
11． 室温下（温度为25℃）静置5分钟，避免光照
12． 即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照（此为终点读数）
13． 实际读数（终点读数－初始读数）：此为背景空对照实际读数
三、 样品测定
1． 移取xx微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
2． 放进分光光度仪，置零
3． 加入xx微升反应液（Reagent B）
4． 加入100微升上述制备的待测样品（注意：样品须清澈）
5． 加入xx微升酶促液I（Reagent D）
6． 上下倾倒数次，混匀
7． 室温下（温度为25℃）静置2分钟，避免光照
8． 即刻放进分光光度仪测读（此为初始读数）
9． 加入xx微升酶促液II（Reagent E）
10． 上下倾倒数次，混匀
11． 室温下（温度为25℃）静置5分钟，避免光照
12． 即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数（此为终点读数）
13． 实际读数（终点读数－初始读数）：此为样品实际读数
四、 计算样品浓度
五、 酶标仪测定
1． 在96孔板上做好相应标记：背景对照和样品
2． 分别移取xx微升缓冲液（Reagent A）到相应孔里
3． 分别加入xx微升反应液（Reagent B）
4． 分别加入xx微升阴性液（Reagent C）或待测样品（注意：样品须清澈）
5． 分别加入xx微升酶促液I（Reagent D）
6． 轻轻摇动96孔板
10． 室温下（温度为25℃）静置2分钟，避免光照
7． 即刻放进分光光度仪测读（此为初始读数）
8． 分别加入xx微升酶促液II（Reagent E）
9． 轻轻摇动96孔板
10． 室温下（温度为25℃）静置5分钟，避免光照
11． 即刻放进分光光度仪测读（此为终点读数）
12． 实际读数＝终点读数－初始读数：包括背景和样品实际读数
13． 浓度计算：
注意事项
1． 本产品为20次（比色皿）和80次（96孔板）操作，包括背景对照
2． 本产品检测范围在0至12微克/毫升乙醇
3． 建议使用比色皿检测
4． 操作时，须戴手套
5． 实验所用的器皿，避免酒精污染
6． 建议样品须澄清（去色、去脂、去蛋白等），避免pH过低；本公司提供乙醇待测样品处理试剂盒－G&VS19021.7
7． 系统操作过程中，背景测定只需1次
8． 样品须澄清，至关重要
9． 加样后即刻比色测定
10． 反应5分钟后比色测定值趋于稳定；测定值由低到高变化
11． 比色测定后，比色皿须清洗彻底
12． 如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度
13． 本公司提供系列营养学元素检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组份订购信息
编号 名称 规格
G&VS19021.9 血液乙醇含量光度法定量检测试剂盒 20/80次
G&VS19021.9A 缓冲液（Reagent A） 毫升
G&VS19021.9B 反应液（Reagent B） 毫升
G&VS19021.9C 阴性液（Reagent C） 毫升
G&VS19021.9D 酶促液I（Reagent D） 毫升
G&VS19021.9E 酶促液II（Reagent E） 毫升
G&VS19021.9F 预处理液（Reagent F） 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19021.1 | 酒类乙醇含量光度法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19021.2 | 乳品乙醇含量光度法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19021.3 | 饮料乙醇含量光度法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19021.4 | 调料乙醇含量光度法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19021.5 | 细胞乙醇含量光度法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19021.6 | 组织乙醇含量光度法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19021.7 | 细菌乙醇含量光度法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19021.8 | 乙醇含量待测样品处理试剂盒 | 20次 |
| G&VS19021.9 | 血液乙醇含量光度法定量检测试剂盒 | 20次 |
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