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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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细胞总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间：2026/11/5 8:19:48 阅读次数：2

细胞总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

细胞总氨基酸含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过酸性热处理后，使用显色染料茚三酮与氨基酸的氨基发生反应，产生紫色复合物，由分光光度仪比色分析，定量检测细胞样品中总氨基酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心设计、成功实验证明的。适用于各种细胞（动物、人体等）裂解悬液样品的总氨基酸含量检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测准确。

技术背景

氨基酸（amino acid或α-amino acid）是一种含有胺和羧基功能基团的分子，为生物体中最必须的元素。根据其侧链的不同，分成四类（弱酸、弱碱、极性、非极性）和20种各种不同的氨基酸；根据其光学异构体（optical isomers），又分成L型和D型。L-氨基酸是构成蛋白质的主要结构分子。氨基酸是多肽、蛋白质和辅酶等的组成单位，具有各种代谢作用和营养价值。通过酸性热处理后，转化成所有游离氨基酸。基于游离氨基酸的游离氨基与茚三酮（ninhydrin）反应，产生中间产物酮酸（keto acid）和氨分子，进而在热处理下，进行脱羧基过程（仅发生于游离氨基酸），同时产生紫色复合物，在分光光度仪（570nm波长）下，呈现吸光峰值的变化，来定量分析氨基酸的总含量。其反应系统如下：

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

酸性液（Reagent B）毫升

缓冲液（Reagent C）毫升

反应液（Reagent D）毫升

标准液（Reagent E）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存标准液（Reagent E）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；酸性液（Reagent B）具有腐蚀性，注意操作安全；反应液（Reagent D）具有挥发性，严格密闭瓶盖，避免光照；有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于标准液配制和样品操作的容器

矿物油：用于样品处理

干式恒温仪：用于反应孵育

细胞刮脱棒：用于细胞脱离

微型台式离心机：用于样品操作

比色皿：用于比色分析的容器

分光光度仪：用于比色分析

实验步骤

一、样品准备

1．准备好25cm²细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞（1至5 X 10⁶细胞）

2．小心加入xx毫升清理液（Reagent A），覆盖生长表面

3．小心抽去清理液

4．使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞

5．加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞

6．移入到预冷的15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）

7．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g

8．小心抽去上清液

9．加入xx微升酸性液（Reagent B），充分混匀

10．转移到预冷的1.5毫升离心管

11．强力涡旋震荡15秒

12．加入用户自备的矿物油

13．放进110℃干式恒温仪孵育20小时

14．放进冰槽里1分钟

15．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

16．小心抽去上层液相矿物油

17．小心移取500微升水相液到新的预冷的1.5毫升离心管

18．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

二、标准样品配制

1．准备好4个1.5毫升离心管，标记为1至4号管

2．按照下表配制标准管浓度

管号	缓冲液（Reagent C）	标准液（Reagent E）	标准氨基酸浓度
1	0	xx微升	xx微摩尔/升
2	xx微升	xx微升	xx微摩尔/升
3	xx微升	xx微升	xx微摩尔/升
5	xx微升	0	0微摩尔/升

三、 标准曲线测定

1．加入xx微升缓冲液（Reagent C）到1.5毫升离心管

2．加入xx微升上述配制的标准液（Reagent E）

3．加入xx微升反应液（Reagent D）

4．涡旋震荡15秒

5．放进90℃干式恒温仪孵育5分钟，避免光照

6．放进冰槽里1分钟

7．转移到比色皿

8．即刻放进分光光度仪检测（波长570nm）：获得吸光读数

9．重复实验步骤1至8四次

10．构建标准曲线：纵座标（Y轴）为吸光读数；横座标（X轴）为标准氨基酸浓度（微摩尔/升）

四、 样品测定

1．加入xx微升缓冲液（Reagent C）到1.5毫升离心管

2．加入500微升待测样品

3．加入xx微升反应液（Reagent D）

4．涡旋震荡15秒

5．放进90℃干式恒温仪孵育5分钟，避免光照

6．放进冰槽里1分钟

7．转移到比色皿

8．即刻放进分光光度仪检测（波长570nm）：获得吸光读数

9．根据标准曲线获得样品对应氨基酸浓度（微摩尔/升）

五、 浓度计算

1. 根据标准曲线获得样品对应氨基酸浓度（微摩尔/升）X稀释倍数 =（微摩尔/升）

注意事项

1．本产品为25次操作，包括标准样品

2．避免使用Tris 缓冲液、尿素等胺类物质处理样品

3．操作时，须戴手套

4．系统操作时，标准样品测定只需1次

5．酸性液（Reagent B）具有腐蚀性，注意操作安全

6．反应液（Reagent D）具有挥发性，严格密闭瓶盖，避免光照

7．孵育时，避免光照

8．本公司提供系列氨基酸检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS19074.1 细胞总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒 20次

G&VS19074.1A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS19074.1B 酸性液（Reagent B）毫升

G&VS19074.1C 缓冲液（Reagent C）毫升

G&VS19074.1D 反应液（Reagent D）毫升

G&VS19074.1E 标准液（Reagent E）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS19074.1	细胞总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19074.2	组织总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19074.3	血液总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19074.4	体液总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19074.5	植物总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19192.1	细胞总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS19192.2	组织总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS19192.3	血液总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS19192.4	体液总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS19192.5	植物总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS19193.1	细胞游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19193.2	组织游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19193.3	血液游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19193.4	体液游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19193.5	植物游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS19194.1	细胞游离氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS19194.2	组织游离氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS19194.3	血液游离氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS19194.4	体液游离氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次
G&VS19194.5	植物游离氨基酸含量荧光定量检测试剂盒	20次