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发布时间:2026/11/5 8:20:33 阅读次数:2
动物源性食品猪源基因定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
动物源性食品猪源基因定量检测试剂盒是一种旨在运用SYBR绿色荧光染料作为标记信号,针对猪种线粒体细胞色素b基因的特异性66碱基片段,快速进行各种DNA模板的扩增,实时检测和定量分析扩增产物,来识别或定量分析其猪源含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于各种食品,包括高压高温消毒处理的肉类产品、烹调食用的原料,以及快速食品中猪源成分的定量检测。产品即到即用,性能稳定,无核酶污染,操作便捷,敏感高效,定量准确,重复性强。
技术背景
食品中含有各种高度加工的动物蛋白(processed animal protein),其真实性(authenticity)、安全性是食品监管的重要问题,尤其是猪源材料食品标签(labeling)成为监测的主要对象。基于线粒体DNA具有高度种系保留、高拷贝数(多达2500拷贝/细胞)、以及真实性(authenticity)、特异性(specificity)和敏感性(sensitivity)的优点,成为识别和鉴定不同动物种系的强有力工具。其中猪的线粒体细胞色素b(cytochrome b)基因的特异DNA序列片段,作为猪的种系特异性(species specific)分子标记,通过扩增其特异产物,进行识别、定性、定量鉴定饲料、食品、猪肉制品等猪类物质成分。SYBR绿色荧光染料,作为DNA结合染料,可以和扩增子(amplican)上双链DNA的任一小沟(minor groove)结合,而发出荧光信号。根据每一循环的荧光强度来确定扩增产物的产量,并用循环阈值(threshold cycle;Ct)表示,计算获得猪源成分的百分比含量。
产品内容
反应液(Reagent A) 微升
染色液(Reagent B) 微升
引物液(Reagent C) 微升
补充液(Reagent D) 微升
封隔液(Reagent E) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;染色液(Reagent B)避免光照;有效保证6月
用户自备
(微型)台式离心机:用于样品处理
PCR管:用于样品扩增操作的容器
荧光定量PCR仪:用于荧光定量PCR反应
实验步骤
实验开始前,从-20℃冰箱中取出试剂,放进冰槽里融化。然后进行下列操作:
1. 一次反应总量为25微升
2. 移取xx微升反应液(Reagent A)到0.5毫升PCR管
3. 加入2微升待测的DNA模板(100纳克总量;根据实际情况,可以增加或减少总DNA量)
4. 加入xx微升染色液(Reagent B)
5. 加入xx微升引物液(Reagent C)
6. 加入xx微升补充液(Reagent D)至总容量为25微升
7. 放进4℃微型台式离心机瞬时离心5秒
8. 使用1000微升枪头加入xx滴封隔液(Reagent E)(注意:参见注意事项11)
9. 即刻放进荧光定量PCR仪
10. 荧光定量PCR反应程序为:
| 温度(℃) | 时间 | 循环 |
| 95 | 10分钟 | 1 |
| 95 60 | 15秒 60秒 |
45 |
11. 进行数据分析
(1) 通过自备的纯化猪线粒体DNA样品构建猪种DNA含量标准曲线:纵坐标Y轴为Ct值,横坐标X轴为猪种纯化线粒体DNA含量(0.01、0.1、1、10、100皮克)(注意:参见注意事项16)
(2) 根据标准曲线,获得待测样品对应标准曲线Ct值所获得含猪DNA量(皮克)
(3) 计算待测样品实际猪源成分含量百分比(%):待测样品含猪DNA量(皮克)÷(100 X 103皮克待测样品总DNA模板)
注意事项
1. 本产品为25次PCR反应(其中5次为标准曲线反应)
2. 本产品检测灵敏度可达0.0001% 或10飞克猪源DNA/10纳克总量DNA
3. 操作时,须戴手套
4. 本产品适合各种荧光定量PCR仪
5. 建议整个操作在4℃下进行
6. 建议使用带滤芯的枪头,避免交叉污染
7. 使用时,避免污染母液
8. 样品DNA的纯度将影响定量扩增的效率
9. 建议使用线粒体DNA为佳
10. 建议使用补充液(Reagent D)作为阴性对照
11. 根据用户PCR仪的性能,决定是否加入封隔液(Reagent F)
12. 配制完成后,即刻进行扩增反应,以确保反应物的活性
13. 试剂避免反复冻融
14. 猪种特异扩增产物片段为66碱基(X56295)
15. PCR扩增反应的最初3个循环为定量基线;3至15个循环的荧光信号的10倍值为荧光阈值;荧光信号达到阈值所需的循环数为Ct值(参考图像如下)
16. 用户可以使用猪线粒体DNA构建猪种DNA含量标准曲线:纵坐标Y轴为Ct值,横坐标X轴为猪种纯化线粒体DNA含量(0.01、0.1、1、10、100皮克);用户根据实际情况调整标准曲线区间范围,例如使用总DNA,可以设立为纳克或微克级
17. 本公司提供系列食品基因分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定无核酶污染
3. 本产品经鉴定检测特异
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组份订购信息
编号 名称 规格
G&VS19086.1.2 动物源性食品猪源基因定量检测试剂盒 20次
G&VS19086.1.2A 反应液(Reagent A) 毫升
G&VS19086.1.2B 染色液(Reagent B) 微升
G&VS19086.1.2C 引物液(Reagent C) 微升
G&VS19086.1.2D 补充液(Reagent D) 毫升
G&VS19086.1.2E 封隔液(Reagent E) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19086.1.1 | 动物源性食品猪源基因定性检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.1.2 | 动物源性食品猪源基因定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.2 | 动物源性食品牛源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.3 | 动物源性食品鸡源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.4 | 动物源性食品火鸡源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.5 | 动物源性食品鸭源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.6 | 动物源性食品羊源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.7 | 动物源性食品山羊源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.8 | 动物源性食品马源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.9 | 动物源性食品鼠源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.10 | 动物源性食品猫源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.11 | 动物源性食品狗源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.12 | 动物源性食品鱼源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.13 | 动物源性食品鲨鱼(shark)源基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19086.14 | 肉类食物样品处理试剂盒 | 20次 |
| G&VS20141.1 | 肉类DNA分离试剂盒 | 10次 |
| G&VS20141.2 | 肉料DNA高质纯化试剂盒 | 10次 |
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