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发布时间:2026/11/5 8:23:42 阅读次数:2
转基因玉米DBT418(Bt Xtra)品系定性基因检测试剂盒产品说明书
主要用途
转基因玉米DBT418(Bt Xtra)品系定性基因检测试剂是一种旨在根据品系特异性转基因分子标志cry1Ac 设计引物,针对种子、食品、饲料等样本DNA进行PCR扩增,获得特异性条带,来识别或定性鉴定其转基因玉米成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于各种种子、食品、饲料等玉米品系DBT418(Bt Xtra)的鉴定。可用于后续测序、载体克隆等实验。产品即到即用,性能稳定,操作简便,扩增特异。
技术背景
转基因农产品(genetically modified organism;GMO)成为食品安全的重要问题,标记和监测作为市场准入的法律依据。目前至少有40多种转基因农作物作为食品使用,其中玉米(corn或maize)是常见品种之一。由美国迪卡布公司(Dekalb Genetics Corporation)开发的玉米品系DBT418,1997年进入市场,其商标名称为Bt Xtra。其特性为具有欧洲玉米螟(European corn borer;ECB)Ostrinia nubilalis的抗性和除草剂草铵膦(glufosinate ammonium;GA)的抗性。品系DBT418由花椰菜花叶病毒(cauliflower mosaic virus)35S启动子(promoter)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki)菌株HD73的杀虫蛋白δ内毒素蛋白(Delta-endotoxins)基因 cry1Ac、土壤细菌吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)的抗草胺膦(glufosinate ammonium)蛋白草胺膦-N-乙酰化转移酶(phosphinothricin-N-acetyltransferase;PAT)基因bar、 氨苄青霉素抗性beta-内酰胺酶(β-lactamase)基因bla、根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)转录体7(transcript 7;Ttr7)Poly A区域、玉米乙醇脱氢酶内显子6(alcohol dehydrogenase intron 6;adhI6)基因、根癌农杆菌章鱼碱合酶(octopine synthase;OCS)促进子、土豆蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)基因pinI促进子I作为转录终止子等外源性基因元素构成。通过Biolistic基因枪粒子轰击法(Microparticle bombardment),将三种载体pDPG165、320和699转化到玉米中而成。其中cry1Ac 基因(66Kd,613氨基酸),作为功能性抗欧洲玉米螟基因,是品系DBT418的分子标记。针对标志基因Cry1Ac进行特异性引物设计,扩增其特异产物,进行识别、定性、定量鉴定种子、食品、饲料等转基因玉米成分。
产品内容
扩增液(Reagent A) 微升
品系引物液(Reagent B) 微升
补充液(Reagent C) 毫升
玉米引物液(Reagent D) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;有效保证6月
用户自备
PCR级矿物油:用于封隔反应液
PCR仪:用于样品扩增
PCR管或平板:用于PCR反应的容器
琼脂糖凝胶电泳:用于扩增后电泳分析
实验步骤
实验开始前,从-20℃冰箱中取出试剂,放进冰槽里融化。然后进行下列操作:
1. 针对一个样本,每次移出xx微升扩增液(Reagent A)到PCR管
2. 加入1微升用户自备的的待测DNA样品(总量100至200纳克)
3. 加入xx微升品系引物液(Reagent B)或玉米引物液(Reagent D)
4. 再加入xx微升补充液(Reagent C)(反应总量为25微升)
5. 即刻放进微型台式离心机瞬时离心5秒,速度为500g(或2000RPM;例如eppendorf 5415)
6. (选择步骤)加入50微升用户自备的PCR级矿物油(注意:参见注意事项9)
7. 即刻进行热启动PCR反应:
8. 反应完毕后,移取5微升进行1.8%琼脂糖凝胶电泳:
9. 如果继续测序鉴定,胶回收PCR产物(建议使用高质纯化胶回收试剂盒;G&VS20007.2)
10. 进行后续的测序反应
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 建议使用带滤芯的枪头,避免污染
4. 在-20℃冰箱里储存的产品避免反复冻融
5. 出现玉米扩增条带:证明为玉米或含有玉米的样品
6. 出现品系扩增条带:证明为DBT418转基因玉米或含有转基因成分的样品
7. 可以将扩增产物纯化后,克隆到质粒中,然后进行测序
8. 如果需要测序,可以订购测序引物
9. 根据用户PCR仪的性能,决定是否加入矿物油(Mineral Oil)
10. 本公司提供系列转基因生物分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定无核酶污染
3. 本产品经鉴定检测特异
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS19077.13.1 转基因玉米DBT418(Bt Xtra)品系定性基因检测试剂盒 20次
G&VS19077.13.1A 扩增液(Reagent A) 1毫升
G&VS19077.13.1B 品系引物液(Reagent B) 1毫升
G&VS19077.13.1C 补充液(Reagent C) 1毫升
G&VS19077.13.1D 玉米引物液(Reagent D) 1毫升
G&VS19079.13.2 转基因玉米DBT418(Bt Xtra)品系基因定量检测试剂盒 20次
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19077.13.1 | 转基因玉米DBT418(Bt Xtra)品系定性基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19077.13.2 | 转基因玉米DBT418(Bt Xtra)品系定量基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19077.14 | 玉米样品处理试剂盒 | 20次 |
| G&VS19082 | 转基因产品NOS基因检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19083 | 转基因产品35S基因检测试剂盒 | 20次 |
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