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转基因玉米MON809品系定性基因检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/11/5 8:25:20      阅读次数:2

 

转基因玉米MON809品系定性基因检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

转基因玉米MON809品系定性基因检测试剂是一种旨在根据品系特异性草甘膦氧化还原酶基因设计引物,针对种子、食品、饲料等样本DNA进行PCR扩增,获得特异性条带,来识别或定性鉴定其转基因玉米成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于各种种子、食品、饲料等玉米品系MON809的鉴定。可用于后续测序、载体克隆等实验。产品即到即用,性能稳定,操作简便,扩增特异。

 

技术背景

转基因农产品(genetically modified organism;GMO)成为食品安全的重要问题,标记和监测作为市场准入的法律依据。目前至少有40多种转基因农作物作为食品使用,其中玉米(corn或maize)是常见品种之一。由美国先锋(Pioneer Hi-Bred International Inc)公司开发的玉米品系MON809,1996年进入市场,其商标名称为YieldGard。其特性为具有欧洲玉米螟(European corn borer;ECB)Ostrinia nubilalis的抗性和除草剂草甘膦(glyphosate)的抗性。品系MON809由花椰菜花叶病毒(cauliflower mosaic virus)35S启动子(promoter)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki)菌株HD1的杀虫蛋白δ内毒素蛋白(Delta-endotoxins)基因cry1Ab、叶绿体转运肽4前导序列(leader sequence)、抗草甘膦(glyphosate)基因5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶基因(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase;EPSPS)、人苍白杆菌(Ochrobactrum anthropi)草甘膦氧化还原酶基因v247(glyphosate oxidase v247)gox v247、玉米热休克蛋白70内显子(HSP70 intron)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)EPSPS叶绿体转运肽(chloroplast transit peptide;CTP)基因2和SSU1A 叶绿体转运肽基因1、大肠杆菌的操纵子(operon)Lac Z和新霉素磷酸转移酶II基因(neomycin phosphotransferase II)nptII、根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)胭脂氨酸合酶(nopaline synthase;NOS)转录终止子等外源性基因元素构成。通过Biolistic基因枪粒子轰击法(Microparticle bombardment),将载体PV-ZMBK07和PV-ZMGT10转化到玉米中而成。其中gox v247基因,作为功能性抗草甘膦基因,是品系MON809的分子标记。针对抗草甘膦基因gox进行特异性引物设计,扩增其特异产物,进行识别、定性、定量鉴定种子、食品、饲料等转基因玉米成分。

 

产品内容

扩增液(Reagent A)     微升

品系引物液(Reagent B) 微升

补充液(Reagent C)     毫升

玉米引物液(Reagent D) 微升

产品说明书            1份

 

保存方式

保存在-20℃冰箱里;有效保证6月

 

用户自备

PCR级矿物油:用于封隔反应液

PCR仪:用于样品扩增

PCR管或平板:用于PCR反应的容器

琼脂糖凝胶电泳:用于扩增后电泳分析

 

实验步骤

实验开始前,从-20℃冰箱中取出试剂,放进冰槽里融化。然后进行下列操作:

1. 针对一个样本,每次移出xx微升扩增液(Reagent A)到PCR管

2. 加入1微升用户自备的的待测DNA样品(总量100至200纳克)

3. 加入xx微升品系引物液(Reagent B)或玉米引物液(Reagent D)

4. 再加入xx微升补充液(Reagent C)(反应总量为25微升)

5. 即刻放进微型台式离心机瞬时离心5秒,速度为500g(或2000RPM;例如eppendorf 5415)

6. (选择步骤)加入50微升用户自备的PCR级矿物油(注意:参见注意事项9)

7. 即刻进行热启动PCR反应:

8. 反应完毕后,移取5微升进行1.8%琼脂糖凝胶电泳:  

9. 结果分析

10. 如果继续测序鉴定,胶回收PCR产物(建议使用高质纯化胶回收试剂盒;G&VS20007.2)

11. 进行后续的测序反应

 

注意事项

1. 本产品为20次操作

2. 操作时,须戴手套

3. 建议使用带滤芯的枪头,避免污染

4. 在-20℃冰箱里储存的产品避免反复冻融

5. 出现玉米扩增条带:证明为玉米或含有玉米的样品

6. 出现单一品系扩增条带103碱基:证明为MON809转基因玉米或含有转基因成分的样品

7. 可以将扩增产物纯化后,克隆到质粒中,然后进行测序

8. 如果需要测序,可以订购测序引物

9. 根据用户PCR仪的性能,决定是否加入矿物油(Mineral Oil)

10. 本公司提供系列转基因生物分析试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定无核酶污染

3. 本产品经鉴定检测特异

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

编号                     名称                              规格

G&VS19077.11.1      转基因玉米MON809品系定性基因检测试剂盒         20次

G&VS19077.11.1A      扩增液(Reagent A)                        1毫升

G&VS19077.11.1B      品系引物液(Reagent B)                      1毫升

G&VS19077.11.1C      补充液(Reagent C)                         1毫升

G&VS19077.11.1D      玉米引物液(Reagent D)                      1毫升

G&VS19079.11.2      转基因玉米MON809品系基因定量检测试剂盒                     20次

产品编号

名称

规格

G&VS19077.11.1

转基因玉米MON809品系定性基因检测试剂盒

20次

G&VS19077.11.2

转基因玉米MON809品系定量基因检测试剂盒

20次

G&VS19077.14

玉米样品处理试剂盒

20次

G&VS19082

转基因产品NOS基因检测试剂盒

20次

G&VS19083

转基因产品35S基因检测试剂盒

20次

 


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