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血液维生素B1含量比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/11/5 8:34:54      阅读次数:2

 

血液维生素B1含量比色法定量检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

血液维生素B1含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过酸性萃取,进而使用铁氰化钾,氧化维生素B1后产生硫色素,直接由分光光度仪比色分析,以定量检测样品维生素B1含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体血液包括血浆、血清等样品中维生素B1的检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

 

技术背景

维生素B1(vitamin B1),又称为硫胺(thiamin),是一种B类复合物中的水溶性维生素,由嘧啶碱基(pyrimidine)和噻唑(thiazol)环通过亚甲桥(methylene bridge)链接而成。化学全名是2-[3-[(4-amino- 2-methyl- pyrimidin- 5-yl) methyl]- 4-methyl- thiazol- 5-yl] ethanol。其分子量为300.84,分子式为C12H17N4OS+Cl-。维生素B1对于碱性溶液、氧化反应和还原反应敏感。维生素B1由植物和微生物产生,以游离、肽结合、磷酯(phospho-ester)形式存在。而人体和动物通过食物获得补充,在胃肠组织通过主动运输和被动弥散予以摄入。其体内代谢中的活化分子为焦磷酸硫胺(thiamine diphosphate/thiamine pyrophosphate;TDP)和三磷酸硫胺(thiamine triphosphate;TTP),作为碳水化合物、脂肪、醇类和氨基酸代谢(氧化羧基化反应;oxidative carboxylation)的主要辅酶。活化分子去磷酸化后,经肾脏排出。维生素B1缺乏,将导致脚气病(beriberi),而出现周围神经炎(peripheral neuritis)、肌无力、瘫痪和心血管系统症状。维生素B1的检测方法,首先通过酸性萃取,然后使用铁氰化钾(potassium ferricyanide),在碱性条件下,氧化硫胺及其衍生物为硫色素(thiochrome)衍生物,进而由有机溶剂萃取后,在分光光度仪下(波长367nm),呈现吸光峰值的变化,来定量分析维生素B1的含量。 

 

产品内容

酸性液(Reagent A)      毫升

反应液(Reagent B)       毫升

阴性液(Reagent C)      毫升

萃取液(Reagent D)      毫升

标准液(Reagent E)      毫升

产品说明书             1份

 

保存方式

保存反应液(Reagent B)和标准液(Reagent E)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;萃取液(Reagent D)具有挥发性,注意密闭瓶盖;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证3月

 

用户自备

无离子水:用于样品操作

1.5毫升离心管:用于样品操作的容器

15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器

台式离心机:用于样品操作

煮沸装置:用于样品煮沸

比色皿:用于比色分析的容器

分光光度仪:用于比色分析

 

实验步骤

一、 样品准备 

选择一:血浆样品

1. 准备好肝素或ACD抗凝管(注意:避免使用EDTA抗凝管)

2. 抽取1毫升血液,置于抗凝管里

3. 放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为700g(或3000RPM,例如eppendorf 5415)

4. 小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分(注意:避免触碰白色液体层)

5. 移取500微升待测血浆到新的15毫升锥形离心管

6. 加入xx毫升酸性液(Reagent A),混匀

7. 涡旋震荡1分钟

8. 100℃温度下,煮沸30分钟

9. 室温下冷却后,加入适量的用户自备的无离子水至总容量为10毫升

10. 放进台式离心机离心5分钟,速度为300g

11. 小心移取上清液到新的15毫升锥形离心管

12. 即刻进行后续分析

13. (选择步骤)放进-20℃保存,避免光照

 

选择二:血清样品

1. 准备好不含抗凝剂的储存管

2. 抽取1毫升血液,置于储存管里

3. 室温下,静置30分钟,直至血液凝结

4. 放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为2000g(或5000RPM,例如eppendorf 5415)

5. 小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分(注意:避免触碰白色液体层)

6. 移取500微升待测血清到新的15毫升锥形离心管

7. 加入xx毫升酸性液(Reagent A),混匀

8. 涡旋震荡1分钟

9. 100℃温度下,煮沸30分钟

10. 室温下冷却后,加入适量的用户自备的无离子水至总容量为10毫升

11. 放进台式离心机离心5分钟,速度为300g

12. 小心移取上清液到新的15毫升锥形离心管

13. 即刻进行后续分析

14. (选择步骤)放进-20℃保存,避免光照

 

二、测定准备

1. 准备好待测样品,置于冰槽里

2. 设定好分光光度仪:波长367nm,并置零

 

三、 样品测定

1. 准备好4个15毫升锥形离心管,分别标记为:标准样品管、标准样品背景对照管、待测样品管、待测样品背景对照管

2. 分别移取xx毫升标准液(Reagent E)到标准样品管和标准样品背景对照管

3. 分别移取2.5毫升上述制备的待测样品到待测样品管和待测样品背景对照管

4. 分别加入xx毫升阴性液(Reagent C)到标准样品背景对照管和待测样品背景对照管

5. 分别加入xx毫升反应液(Reagent B)到标准样品管和待测样品管

6. 温和震荡混匀30秒

7. 即刻分别加入10毫升萃取液(Reagent D)

8. 涡旋振荡90秒

9. 放进台式离心机离心5分钟,速度为300g

10. 移取1毫升或3毫升上清液到相应的比色皿

11. 即刻放进分光光度仪检测(367nm 波长),获得吸光读数

12. 标准样品实际读数=标准样品读数-标准样品背景读数

13. 待测样品实际读数=待测样品读数-待测样品背景读数

 

三、计算样品浓度

 

注意事项

1. 本产品为20次操作  

2. 本产品检测范围为0.8至50微克/毫升维生素B1

3. 操作时,须戴手套

4. 试剂具有挥发性,注意密闭瓶盖或使用封口膜

5. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全

6. 系统操作时,标准样品和标准样品背景对照测定只需一次

7. 待测样品及其背景对照测定需平行进行

8. 由于反应较快,加入反应液(Reagent B)后,不宜超过30秒

9. 用户可以使用荧光分光光度仪检测:激发波长365nm,散发波长435nm

10. 含量可以表述为:微克/毫克蛋白;微克/毫升

11. 本公司提供系列维生素检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

单组份订购信息

编号             名称                    规格

G&VS19067.1.2    血液维生素B1含量比色法定量检测试剂盒   20次

G&VS19067.1.2A    酸性液(Reagent A)                 毫升

G&VS19067.1.2B    反应液(Reagent B)              毫升

G&VS19067.1.2C    阴性液(Reagent C)                  毫升

G&VS19067.1.2D    萃取液(Reagent D)               毫升

G&VS19067.1.2E    标准液(Reagent E)              毫升

 

试剂盒订购信息 

产品编号

名称

规格

G&VS19067.1.1

通用型维生素B1比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19067.1.2

血液维生素B1比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19067.1.3

食物维生素B1比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19067.1.4

植物维生素B1比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19067.1.5

细菌维生素B1比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19067.1.6

酵母维生素B1比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19067.1.7

体液维生素B1比色法定量检测试剂盒

20次

 


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