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发布时间:2026/11/5 8:35:39 阅读次数:2
通用型维生素B1含量比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
通用型维生素B1含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过酸性萃取,进而使用铁氰化钾,氧化维生素B1后产生硫色素,直接由分光光度仪比色分析,以定量检测样品维生素B1含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种食物、组织、血液、体液、酵母、细菌等样品中维生素B1的检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
维生素B1(vitamin B1),又称为硫胺(thiamin),是一种B类复合物中的水溶性维生素,由嘧啶碱基(pyrimidine)和噻唑(thiazol)环通过亚甲桥(methylene bridge)链接而成。化学全名是2-[3-[(4-amino- 2-methyl- pyrimidin- 5-yl) methyl]- 4-methyl- thiazol- 5-yl] ethanol。其分子量为300.84,分子式为C12H17N4OS+Cl-。维生素B1对于碱性溶液、氧化反应和还原反应敏感。维生素B1由植物和微生物产生,以游离、肽结合、磷酯(phospho-ester)形式存在。而人体和动物通过食物获得补充,在胃肠组织通过主动运输和被动弥散予以摄入。其体内代谢中的活化分子为焦磷酸硫胺(thiamine diphosphate/thiamine pyrophosphate;TDP)和三磷酸硫胺(thiamine triphosphate;TTP),作为碳水化合物、脂肪、醇类和氨基酸代谢(氧化羧基化反应;oxidative carboxylation)的主要辅酶。活化分子去磷酸化后,经肾脏排出。维生素B1缺乏,将导致脚气病(beriberi),而出现周围神经炎(peripheral neuritis)、肌无力、瘫痪和心血管系统症状。维生素B1的检测方法,首先通过酸性萃取,然后使用铁氰化钾(potassium ferricyanide),在碱性条件下,氧化硫胺及其衍生物为硫色素(thiochrome)衍生物,进而由有机溶剂萃取后,在分光光度仪下(波长367nm),呈现吸光峰值的变化,来定量分析维生素B1的含量。
产品内容
酸性液(Reagent A) 毫升
反应液(Reagent B) 毫升
阴性液(Reagent C) 毫升
萃取液(Reagent D) 毫升
标准液(Reagent E) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存反应液(Reagent B)和标准液(Reagent E)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;萃取液(Reagent D)具有挥发性,注意密闭瓶盖;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证3月
用户自备
无离子水:用于样品操作
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
台式离心机:用于样品操作
煮沸装置:用于样品煮沸
比色皿:用于比色分析的容器
分光光度仪:用于比色分析
实验步骤
一、 样品准备
1)固态样品准备
1. 秤取500毫克待测固态样品
2. 移入到一个液氮冻存管
3. 即刻放进液氮罐过夜
4. 次日从液氮罐里取出,即刻(最快速度)碾碎组织成粉末(注意:切莫使样品冻融)
5. 转移到15毫升锥形离心管
6. 加入xx毫升酸性液(Reagent A),混匀
7. 涡旋震荡1分钟
8. 100℃温度下,煮沸30分钟
9. 室温下冷却后,加入适量的用户自备的无离子水至总容量为10毫升
10. 放进台式离心机离心5分钟,速度为300g
11. 小心移取上清液到新的15毫升锥形离心管
12. 即刻进行后续分析
13. (选择步骤)放进-20℃保存,避免光照
2)液态样品准备
1. 移取1毫升待测液态样品到新的15毫升锥形离心管
2. 加入xx毫升酸性液(Reagent A),混匀
3. 涡旋震荡1分钟
4. 100℃温度下,煮沸30分钟
5. 室温下冷却后,加入适量的用户自备的无离子水至总容量为10毫升
6. 放进台式离心机离心5分钟,速度为300g
7. 小心移取上清液到新的15毫升锥形离心管
8. 即刻进行后续分析
9. (选择步骤)放进-20℃保存,避免光照
二、测定准备
1. 准备好待测样品,置于冰槽里
2. 设定好分光光度仪:波长367nm,并置零
三、 样品测定
1. 准备好4个15毫升锥形离心管,分别标记为:标准样品管、标准样品背景对照管、待测样品管、待测样品背景对照管
2. 分别移取xx毫升标准液(Reagent E)到标准样品管和标准样品背景对照管
3. 分别移取2.5毫升上述制备的待测样品到待测样品管和待测样品背景对照管
4. 分别加入xx毫升阴性液(Reagent C)到标准样品背景对照管和待测样品背景对照管
5. 分别加入xx毫升反应液(Reagent B)到标准样品管和待测样品管
6. 温和震荡混匀30秒
7. 即刻分别加入xx毫升萃取液(Reagent D)
8. 涡旋振荡90秒
9. 放进台式离心机离心5分钟,速度为300g
10. 移取1毫升或3毫升上清液到相应的比色皿
11. 即刻放进分光光度仪检测(367nm 波长),获得吸光读数
12. 标准样品实际读数=标准样品读数-标准样品背景读数
13. 待测样品实际读数=待测样品读数-待测样品背景读数
三、计算样品浓度
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 本产品检测范围为0.8至50微克/毫升维生素B1
3. 操作时,须戴手套
4. 试剂具有挥发性,注意密闭瓶盖或使用封口膜
5. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全
6. 系统操作时,标准样品和标准样品背景对照测定只需一次
7. 待测样品及其背景对照测定需平行进行
8. 由于反应较快,加入反应液(Reagent B)后,不宜超过30秒
9. 用户可以使用荧光分光光度仪检测:激发波长365nm,散发波长435nm
10. 含量可以表述为:微克/毫克蛋白;微克/毫升;微克/毫克组织重量
11. 本公司提供系列维生素检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组份订购信息
编号 名称 规格
G&VS19067.1.1 通用型维生素B1含量比色法定量检测试剂盒 20次
G&VS19067.1.1A 酸性液(Reagent A) 毫升
G&VS19067.1.1B 反应液(Reagent B) 毫升
G&VS19067.1.1C 阴性液(Reagent C) 毫升
G&VS19067.1.1D 萃取液(Reagent D) 毫升
G&VS19067.1.1E 标准液(Reagent E) 毫升
试剂盒订购信息
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19067.1.1 | 通用型维生素B1比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19067.1.2 | 血液维生素B1比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19067.1.3 | 食物维生素B1比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19067.1.4 | 植物维生素B1比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19067.1.5 | 细菌维生素B1比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19067.1.6 | 酵母维生素B1比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
| G&VS19067.1.7 | 体液维生素B1比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
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