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发布时间:2026/11/5 8:39:11 阅读次数:2
糖原化学水解比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
糖原化学水解比色法定量检测试剂是一种旨在通过乙醇去脂、酸化水解等处理后, 在葡萄糖氧化 酶和过氧化物酶的双酶反应系统下,测定样品中水解产物葡萄糖转化为有色醌亚胺,即采用比色法测算糖 原含量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适用于各种细胞、 组织(动物、人体、植物等)裂解悬液样品糖原含量的检测。产品即到即用,操作简捷, 性能稳定,检测 敏感。
技术背景
糖原(glycogen)是以α - 1,4主链,α- 1,6旁链形式的葡萄糖多聚体。作为动物体内主要的短期能量储备分 子, 糖原由肝脏和肌肉生成, 并存在于皮肤、肝脏、甲状旁腺(parathyroid gland)、骨骼肌和心肌中。异常 利用糖原常见于糖尿病和遗传性糖原存储疾病(genetic glycogen storage disease)等。基于糖原分子受到酸 性水解后, 产生葡萄糖, 经过葡萄糖氧化酶(glucose oxidase) 的氧化, 成为葡萄糖酸(gluconate) 和过氧 化氢, 再与4-氨基安替比林(4-aminoantipyrine; 4-AA) 反应,过氧化物酶(peroxidase) 帮助生成红色的 有色醌亚胺(quinoneimine dye),在分光光度仪(510nm 波长)下出现吸光峰值的变化,来定量测定样品 中糖原的含量。其反应系统为:
| 产品内容 |
|
| 清理液(Reagent A) | 毫升 |
| 碱性液(Reagent B) | 毫升 |
| 水解液(Reagent C) | 毫升 |
| 萃取液(Reagent D) | 毫升 |
| 净化液(Reagent E) | 毫升 |
| 酸性液(Reagent F) | 毫升 |
| 中和液(Reagent G) | 毫升 |
| 缓冲液(Reagent H) | 毫升 |
| 反应液(Reagent I) | 毫升 |
| 催化液(Reagent J) | 毫升 |
| 标准液(Reagent K) | 微升 |
| 产品说明书 | 1 份 |
|
保存方式 |
|
保存 催化液(Reagent J) 在-20℃冰箱里,其余的保存在 4℃冰箱里;试剂具有腐蚀性,注意 操作安全; 反应液(Reagent I) 避免光照;有效保证 6 月
用户自备
1.5 毫升离心管:用于标准样品配制的容器
2 毫升离心管:用于样品操作的容器
(微型)台式离心机:用于样品制备
干式恒温仪或恒温水槽:用于反应孵育
比色皿:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
实验步骤
一、 样品准备
1. 准备好待测培养细胞(1 X 106细胞)或组织(200 毫克)
2. 移入到预冷的 15 毫升锥形离心管
3. 放进 4℃台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g
4. 小心抽去上清液
5. 小心加入 毫升 清理液(Reagent A),混匀
6. 放进 4℃台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g
7. 小心抽去上清液
8. 加入 微升 碱性液(Reagent B)
9. 涡旋震荡 15 秒
10.转移到 2 毫升离心管
11.放进 100℃干式恒温仪孵育 10 分钟
12.放进冰槽里孵育 5 分钟
13.加入 微升预冷的 水解液(Reagent C)
14.涡旋震荡 15 秒
15.加入 毫升 萃取液(Reagent D)
16.置于冰槽里孵育 30 分钟
17.放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 3000g (或 5500RPM,例如 eppendorf 5415)
18.小心抽去上清液
19.加入 毫升 净化液(Reagent E)
20.涡旋震荡 15 秒
21.放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 3000g (或 5500RPM,例如 eppendorf 5415)
22.小心抽去上清液
23.加入 微升 酸性液(Reagent F)
24.涡旋震荡 15 秒
25.放进 100℃干式恒温仪孵育 10 分钟
26.放进冰槽里孵育 5 分钟
27.加入 微升 中和液(Reagent G),混匀
28.移取 200 微升到新的 2 毫升离心管
29.加入 毫升 缓冲液(Reagent H)
30.上下倾倒数次,混匀
31.放进 4℃微型台式离心机离心 2 分钟,速度为 3000g (或 5500RPM,例如 eppendorf 5415)
32.小心移取上清液到新的 2 毫升离心管
33.即刻置于冰槽里备用
二、标准样品配制
1 . 准备好 5 个 1.5 毫升离心管,标记为 1 至 5 号管
2 . 按下表依次加入 标准液(Reagent K) 和 缓冲液(Reagent H);标准管浓度见下 表
| 管号 | 标准液(Reagent K) | 缓冲液(Reagent H) | 标准葡萄糖浓度 |
| 1 | 微升 | ―― | 微摩尔/毫升 |
| 2 | 微升 | 微升 | 微摩尔/毫升 |
| 3 | 微升 | 微升 | 微摩尔/毫升 |
| 4 | 微升 | 微升 | 微摩尔/毫升 |
| 5 | 微升 | 微升 | 0 |
三、 样品测定
1. 设定好分光光度仪:波长 510nm,并置零
2. 分别移取 微升 反应液(Reagent I) 到新的比色皿
3. 分别加入 200 微升上述制备的标准样品或待测样品
4. 分别加入 微升 催化液(Reagent J)
5. 上下倾倒混匀
6. 放进 40℃恒温培养箱孵育 30 分钟,避免光照
7. 即刻放进分光光度仪检测:获得吸光读数
8. 构建标准曲线:纵座标(Y 轴)为吸光读数;横座标(X 轴)为标准葡萄糖浓度(微摩尔/毫升)
9. 根据标准曲线计算样品葡萄糖浓度
10.计算样品实际葡萄糖浓度(微摩尔/毫升或微摩尔/毫克)
注意事项
1 . 本产品为 25 次操作,包括标准液
2 . 操作时,须戴手套
3 . 试剂具有腐蚀性,注意操作安全
4 . 孵育时,避免光照
5. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度;注意在计算实际浓度时,不要忘记调整计算公式
6 . 本公司提供系列糖原检测试剂产品
质量标准
1 . 本产品经鉴定性能稳定
2 . 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK , RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
| 编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19065. 1 | 糖原化学水解比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19065. 1A | 清理液(Reagent A) | 100 毫升 |
| G&VS19065. 1B | 碱性液(Reagent B) | 100 毫升 |
| G&VS19065. 1C | 水解液(Reagent C) | 50 毫升 |
| G&VS19065. 1D | 萃取液(Reagent D) | 100 毫升 |
| G&VS19065. 1E | 净化液(Reagent E) | 100 毫升 |
| G&VS19065. 1F | 酸性液(Reagent F) | 100 毫升 |
| G&VS19065. 1G | 中和液(Reagent G) | 100 毫升 |
| G&VS19065. 1H | 缓冲液(Reagent H) | 100 毫升 |
| G&VS19065. 1I | 反应液(Reagent I) | 100 毫升 |
| G&VS19065. 1J | 催化液(Reagent J) | 10 毫升 |
| G&VS19065. 1K | 标准液(Reagent K) | 5 毫升 |
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS70067. 1 | 细胞糖原化学水解比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS70067.2 | 组织糖原化学水解比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS70068. 1 | 细胞糖原酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS70068.2 | 组织糖原酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS70085. 1 | 细胞糖原硫酸蒽酮比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS70085.2 | 组织糖原硫酸蒽酮比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19065. 1 | 糖原化学水解比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19065.2 | 糖原酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS80027. 1 | 石蜡切片糖原高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒 | 50 次 |
| G&VS80027.2 | 冰冻切片糖原高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒 | 50 次 |
| G&VS80027.3 | 石蜡切片糖原淀粉酶(DIASTASE)法染色试剂盒 | 50 次 |
| G&VS80027.4 | 冰冻切片糖原淀粉酶(DIASTASE)法染色试剂盒 | 50 次 |
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