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糖原化学水解比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/11/5 8:39:11      阅读次数:2

 

糖原化学水解比色法定量检测试剂盒产品说明书

主要用途

糖原化学水解比色法定量检测试剂是一种旨在通过乙醇去脂、酸化水解等处理后, 在葡萄糖氧化 酶和过氧化物酶的双酶反应系统下,测定样品中水解产物葡萄糖转化为有色醌亚胺,即采用比色法测算糖 原含量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适用于各种细胞、 组织(动物、人体、植物等)裂解悬液样品糖原含量的检测。产品即到即用,操作简捷, 性能稳定,检测 敏感。

技术背景

糖原(glycogen)是以α - 1,4主链,α- 1,6旁链形式的葡萄糖多聚体。作为动物体内主要的短期能量储备分 子, 糖原由肝脏和肌肉生成, 并存在于皮肤、肝脏、甲状旁腺(parathyroid gland)、骨骼肌和心肌中。异常 利用糖原常见于糖尿病和遗传性糖原存储疾病(genetic glycogen storage disease)等。基于糖原分子受到酸 性水解后, 产生葡萄糖, 经过葡萄糖氧化酶(glucose oxidase) 的氧化, 成为葡萄糖酸(gluconate) 和过氧 化氢, 再与4-氨基安替比林(4-aminoantipyrine;  4-AA) 反应,过氧化物酶(peroxidase) 帮助生成红色的 有色醌亚胺(quinoneimine dye),在分光光度仪(510nm  波长)下出现吸光峰值的变化,来定量测定样品 中糖原的含量。其反应系统为:

 

产品内容

 

清理液(Reagent A)

毫升

碱性液(Reagent B)

毫升

水解液(Reagent C)

毫升

萃取液(Reagent D)

毫升

净化液(Reagent E)

毫升

酸性液(Reagent F)

毫升

中和液(Reagent G)

毫升

缓冲液(Reagent H)

毫升

反应液(Reagent I)

毫升

催化液(Reagent J)

毫升

标准液(Reagent K)

微升

产品说明书

1 份

 

保存方式

 

 保存 催化液(Reagent J)  在-20℃冰箱里,其余的保存在 4℃冰箱里;试剂具有腐蚀性,注意 操作安全; 反应液(Reagent I) 避免光照;有效保证 6 月

 

用户自备

 

1.5 毫升离心管:用于标准样品配制的容器

2 毫升离心管:用于样品操作的容器

(微型)台式离心机:用于样品制备

干式恒温仪或恒温水槽:用于反应孵育

比色皿:用于比色的容器

分光光度仪:用于比色分析

 

实验步骤

一、  样品准备

1.  准备好待测培养细胞(1 X 106细胞)或组织(200 毫克)

2.  移入到预冷的 15 毫升锥形离心管

3.  放进 4℃台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g

4.  小心抽去上清液

5.  小心加入    毫升 清理液(Reagent A),混匀

6.  放进 4℃台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g

7.  小心抽去上清液

8.  加入    微升 碱性液(Reagent B)

9.  涡旋震荡 15 秒

10.转移到 2 毫升离心管

11.放进 100℃干式恒温仪孵育 10 分钟

12.放进冰槽里孵育 5 分钟

13.加入    微升预冷的 水解液(Reagent C)

14.涡旋震荡 15 秒

15.加入    毫升 萃取液(Reagent D)

16.置于冰槽里孵育 30 分钟

17.放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 3000g  (或 5500RPM,例如 eppendorf 5415)

18.小心抽去上清液

19.加入    毫升 净化液(Reagent E)

20.涡旋震荡 15 秒

21.放进 4℃微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 3000g  (或 5500RPM,例如 eppendorf 5415)

22.小心抽去上清液

23.加入    微升 酸性液(Reagent F)

24.涡旋震荡 15 秒

25.放进 100℃干式恒温仪孵育 10 分钟

26.放进冰槽里孵育 5 分钟

27.加入    微升 中和液(Reagent G),混匀

28.移取 200 微升到新的 2 毫升离心管

29.加入    毫升 缓冲液(Reagent H)

30.上下倾倒数次,混匀

31.放进 4℃微型台式离心机离心 2 分钟,速度为 3000g  (或 5500RPM,例如 eppendorf 5415)

32.小心移取上清液到新的 2 毫升离心管

33.即刻置于冰槽里备用

 

二、标准样品配制

1 .  准备好 5 个 1.5 毫升离心管,标记为 1 至 5 号管

2 .  按下表依次加入 标准液(Reagent K) 和 缓冲液(Reagent H);标准管浓度见下 表

管号

 标准液(Reagent K)

缓冲液(Reagent H)

标准葡萄糖浓度

1

微升

――

微摩尔/毫升

2

微升

微升

微摩尔/毫升

3

微升

微升

微摩尔/毫升

4

微升

微升

微摩尔/毫升

5

微升

微升

0

 

三、  样品测定

1.  设定好分光光度仪:波长 510nm,并置零

2.  分别移取    微升 反应液(Reagent I) 到新的比色皿

3.  分别加入 200 微升上述制备的标准样品或待测样品

4.  分别加入    微升 催化液(Reagent J)

5.  上下倾倒混匀

6.  放进 40℃恒温培养箱孵育 30 分钟,避免光照

7.  即刻放进分光光度仪检测:获得吸光读数

8.  构建标准曲线:纵座标(Y 轴)为吸光读数;横座标(X 轴)为标准葡萄糖浓度(微摩尔/毫升)

9.  根据标准曲线计算样品葡萄糖浓度

10.计算样品实际葡萄糖浓度(微摩尔/毫升或微摩尔/毫克)


注意事项

1 .  本产品为 25 次操作,包括标准液

2 .  操作时,须戴手套

3 .  试剂具有腐蚀性,注意操作安全

4 .  孵育时,避免光照

5.  如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度;注意在计算实际浓度时,不要忘记调整计算公式

6 .  本公司提供系列糖原检测试剂产品

 

质量标准


 

1 .  本产品经鉴定性能稳定

2 .  本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系,并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK ,  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

 

编号

名称

规格

G&VS19065. 1

糖原化学水解比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19065. 1A

清理液(Reagent A)

100 毫升

G&VS19065. 1B

碱性液(Reagent B)

100 毫升

G&VS19065. 1C

水解液(Reagent C)

50 毫升

G&VS19065. 1D

萃取液(Reagent D)

100 毫升

G&VS19065. 1E

净化液(Reagent E)

100 毫升

G&VS19065. 1F

酸性液(Reagent F)

100 毫升

G&VS19065. 1G

中和液(Reagent G)

100 毫升

G&VS19065. 1H

缓冲液(Reagent H)

100 毫升

G&VS19065. 1I

反应液(Reagent I)

100 毫升

G&VS19065. 1J

催化液(Reagent J)

10 毫升

G&VS19065. 1K

标准液(Reagent K)

5 毫升

 

产品编号

名称

规格

G&VS70067. 1

细胞糖原化学水解比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS70067.2

组织糖原化学水解比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS70068. 1

细胞糖原酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS70068.2

组织糖原酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS70085. 1

细胞糖原硫酸蒽酮比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS70085.2

组织糖原硫酸蒽酮比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19065. 1

糖原化学水解比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS19065.2

糖原酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒

20 次

G&VS80027. 1

石蜡切片糖原高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒

50 次

G&VS80027.2

冰冻切片糖原高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒

50 次

G&VS80027.3

石蜡切片糖原淀粉酶(DIASTASE)法染色试剂盒

50 次

G&VS80027.4

冰冻切片糖原淀粉酶(DIASTASE)法染色试剂盒

50 次

 


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