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RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

发布时间：2024/6/26 16:54:29 阅读次数：162

RAW 264.7 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

一、细胞基本属性
细胞货号	JW-CL-0582
细胞种属	小鼠
生长情况	半贴壁
培养条件	DMEM+10%FBS+1% P/S
培养环境	air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期	2-3 天
培养基体积	T25 瓶 10-12ml； 10cm 皿 12-15ml
传代比例	1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法	1. 轻轻吸走培养上清，留 2-3ml 培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞； 2. 混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心 3-5min ，弃上清； 3. 加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 4. 补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项	半贴壁细胞会附着瓶底，但贴壁不紧，轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落，不需要胰酶消化。建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或 92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格	200-300 万/ml ， 1ml 每管
冻存方法	1. 离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3. 将冻存管转入程序冻存盒，放入-80 度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中 4 度静置 5- 10min ，再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

Tips：1.细胞半贴壁圆形或多角形生长，部分悬浮圆形，传代时均可收集培养，换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶，若贴壁细胞较多活性较好时可以不要悬浮的细胞； 2.该细胞对胰酶比较敏感，胰酶消化后细胞形态会更多梭形，贴壁变紧，传代不建议使用胰酶消化该细胞； 3.该细胞生长较快，培养基消耗较快，培养时注意密切关注细胞状态，密度较高、培养基有变黄趋势时及时换液避免细胞状态变差；