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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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真菌/酵母丙酮酸含量光度法定量检测试剂盒

发布时间：2026/11/5 8:40:36 阅读次数：2

真菌/酵母丙酮酸含量光度法定量检测试剂盒

主要用途

真菌/酵母丙酮酸含量光度法定量检测试剂是一种旨在通过D-乳酸脱氢酶反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用光度法来测定样品中丙酮酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种真菌/酵母细胞裂解悬液样品丙酮酸水平的检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

丙酮酸（pyruvic acid）是一种有机酸，α-酮酸（keto acid）类的酮（ketone），分子式CH3COCOOH，分子量88.06。丙酮酸是多种代谢通路中的关键交集点，即通过糖酵解获得，在柠檬酸循环中为细胞提供能量：例如通过糖异生（gluconeogenesis），转变为碳水化合物，以及通过脱羧基化转化为乙酰辅酶A，产生脂肪酸等。丙酮酸在乳酸脱氢酶的作用下，产生乳酸。作为发酵产物，丙酮酸常见于啤酒中。同时在葡萄酒、水果、奶酪和食物添加剂中存在。血液和尿液丙酮酸水平是临床诊断的指标之一。基于底物丙酮酸在D-乳酸脱氢酶的催化下，产生D-乳酸（D-Lactate）。同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），其氧化后吸光峰值的变化（340nm 波长），来定量测定丙酮酸的含量。丙酮酸反应系统为：

产品内容

裂解液（Reagent A）毫升

强化液（Reagent B）克

缓冲液（Reagent C）毫升

反应液（Reagent D）毫升

底物液（Reagent E）毫升

阴性液（Reagent F）微升

产品说明书 1份

保存方式

保存反应液（Reagent D）和底物液（Reagent E）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，底物液（Reagent E）避免光照；有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于样品制备的容器

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

微型台式离心机：用于样品制备

培养箱或恒温水槽：用于反应孵育

比色皿或96孔板：用于光度分析的容器

分光光度仪或酶标仪：用于光度分析

实验步骤

一、样品准备

1．准备好10毫升待测的新鲜真菌/酵母细胞（OD600＝0.4至0.8，即1至2 X 10⁷细胞/毫升）

2．移入到预冷的15毫升锥形离心管

3．置于冰槽里5分钟

4．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为1000g

5．小心抽去上清液

6．加入xx微升裂解液（Reagent A），充分混匀

7．转移到预冷的1.5毫升离心管

8．加入xx毫克强化液（Reagent B）

9．强力涡旋震荡15秒

10．置于冰槽里1分钟

11．重复实验步骤9至10五次

12．加入xx微升裂解液（Reagent A），充分混匀

13．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

14．小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管

15．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

16．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

二、 测定准备

1．准备好待测样品，置于冰槽里

2．设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长340nm，设定0分钟和5分钟各测读一次，并置零

3． 缓冲液（Reagent C）室温下均衡温度；底物液（Reagent E）避免光照

三、 背景对照测定

1．移取xx微升缓冲液（Reagent C）到新的比色皿

2．加入xx微升反应液（Reagent D）

3．加入xx微升底物液（Reagent E）

4．加入xx微升阴性液（Reagent F）

5．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）

6．在37℃温度下孵育5分钟

7．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照读数（0分钟读数－5分钟读数）

四、样品测定

1．移取xx微升缓冲液（Reagent C）到新的比色皿

2．加入xx微升反应液（Reagent D）

3．加入xx微升底物液（Reagent E）

4．加入20微升待测样品（100微克蛋白总量）

5．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）

6．在37℃温度下孵育5分钟

7．即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数（0分钟读数－5分钟读数）

五、 计算样品浓度

六、 酶标仪测定

1．在96孔板上做好相应标记：背景对照和样品

2．分别移取xx微升缓冲液（Reagent C）到相应孔里

3．分别加入xx微升反应液（Reagent D）

4．分别加入xx微升底物液（Reagent E）

5．分别加入xx微升阴性液（Reagent F）或待测样品（100微克蛋白总量）

6．轻轻摇动96孔板

7．在37℃温度下孵育5分钟

8．即刻放进酶标仪检测，获得吸光读数（0分钟读数－5分钟读数）

9．浓度计算

注意事项

1．本产品为20次（比色皿）和80次（96孔板）操作，包括背景对照

2．本产品检测范围为0.3至40微克丙酮酸

3．操作时，须戴手套

4．系统操作过程中，背景测定只需1次

5．样品须澄清，至关重要

6． 强化液（Reagent B）为固体状，移取方法为：使用0.5毫升PCR管的盖子内圈盛满；或秤重0.1克

7．如果样品中存在高浓度的蛋白、脂肪酸、酚类等物质，建议进行样品预处理（去色、去脂、去蛋白、去气体等）；本公司提供丙酮酸待测样品处理试剂盒－G&VS19055.10

8．测定值由高到低变化，表明样品丙酮酸阳性

9．反应5分钟后光度测定值趋于稳定；如果仍有波动，建议适当延长检测时间，直至读数稳定

10．光度测定后，比色皿须清洗彻底

11．建议待测样本蛋白浓度为100微克/20微升；如果样本丙酮酸含量过低或过高，则可以增加或降低样本量（本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

12．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品量

13．本公司提供系列营养学检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS19055.8 真菌/酵母丙酮酸含量光度法定量检测试剂盒 20/80次

G&VS19055.8A 裂解液（Reagent A）毫升

G&VS19055.8B 强化液（Reagent B）克

G&VS19055.8C 缓冲液（Reagent C）毫升

G&VS19055.8D 反应液（Reagent D）毫升

G&VS19055.8E 底物液（Reagent E）毫升

G&VS19055.8F 阴性液（Reagent F）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS19055.1	酒类丙酮酸光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS19055.2	饮料丙酮酸光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS19055.3	添加剂丙酮酸光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS19055.4	生物样品丙酮酸光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS19055.5	细胞丙酮酸光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS19055.6	组织丙酮酸光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS19055.7	植物丙酮酸光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS19055.8	真菌/酵母丙酮酸光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS19055.9	细菌丙酮酸光度法定量检测试剂盒	20次
G&VS19055.10	丙酮酸待测样品处理试剂盒	20次