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细胞碘含量S-K比色法定量检测试剂盒产品说明书

发布时间:2026/11/5 8:41:21      阅读次数:2

 

细胞碘含量S-K比色法定量检测试剂盒产品说明书

 

主要用途

细胞碘含量S-K比色法定量检测试剂是一种旨在通过过硫酸铵消解处理后,释放出游离碘分子,在亚砷酸 存在下,催化硫酸铈铵的还原,由分光光度仪比色分析,定量检测细胞样品碘含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良桑德尔-科尔托夫(Sandell-kolthoff)方法、成功实验证明的。适用于各种细胞(动物、人体等)裂解悬液样品中碘含量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测准确。

 

技术背景

碘(iodine)为人体必需矿物素,是甲状腺激素的重要元素,通过营养食物获得。由碘加入到氨基酸酪氨酸,构成甲状腺激素T3或T4。其中T3可以激活代谢通路,包括增加体温和耗氧、加速碳水化合物吸收、促进脂肪释放、支持胆固醇转化和蛋白质合成、调节体内水平衡和骨代谢,以及骨骼与脑发育等。碘缺乏,会导致不可逆性呆小症、怀孕并发症、甲状腺肿大、精神障碍、认知功能降低、先天性发育异常等。尿碘水平作为碘摄入的生物指标。经典尿碘测定法是桑德尔-科尔托夫(Sandell-kolthoff)反应,即铈-砷还原法。通过碘化物,在亚砷酸 (arsenious acid)存在下,催化硫酸铈铵(ceric ammonium sulfate)的还原,由黄色变成无色,通过分光光度仪(405nm波长)检测,产生吸光峰值的下降变化,来测定碘的含量。 

 

产品内容

清理液(Reagent A)    毫升

裂解液(Reagent B)     毫升

处理液(Reagent C)     毫升

反应液A(Reagent D)  毫升

反应液B(Reagent E)  毫升

标准液(Reagent F)    微升

产品说明书        1份

 

保存方式

保存清理液(Reagent A)和裂解液(Reagent B)在4℃冰箱里,其余的保存在—20℃冰箱里,避免光照;反应液A(Reagent D)和反应液B(Reagent E)具有毒性和腐蚀性,严格注意操作安全;有效保证6月

 

用户自备

1.5毫升离心管:用于样品操作的容器

100℃水槽:用于反应孵育

细胞刮脱棒:用于细胞脱离

微型台式离心机:用于样品操作

一次性比色皿或96孔板:用于比色分析的容器

分光光度仪或酶标仪:用于比色分析

 

实验步骤

一、样品准备

1. 准备好75cm2细胞培养瓶或100mm细胞培养皿的待测培养细胞(1至5 X 107细胞)

2. 小心加入xx毫升清理液(Reagent A),覆盖生长表面

3. 小心抽去清理液

4. 使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞(注意:可以使用胰酶消化)

5. 加入xx毫升清理液(Reagent A),混匀细胞

6. 移入到预冷的15毫升锥形离心管(注意:悬浮细胞从这一步骤开始)

7. 放进4℃台式离心机离心5分钟,速度为300g

8. 小心抽去上清液

9. 加入xx微升裂解液(Reagent B),充分混匀

10. 转移到预冷的1.5毫升离心管

11. 强力涡旋震荡15秒

12. 置于冰槽里孵育30分钟

13. 放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)

14. 小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管——作为蛋白定量检测之用

15. 移取10微升上清液进行蛋白定量检测(注意:建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-G&VS30030.1)

16. 即刻放进-70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

 

二、标准样品配制

1. 准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至5号管

2. 分别加入xx微升清理液(Reagent A)到1至5号管

3. 移取xx微升标准液(Reagent F)到1号管,混匀

4. 小心移取xx微升1号管稀释的标准液(Reagent F)到2号管,混匀

5. 小心移取xx微升2号管稀释的标准液(Reagent F)到3号管,混匀

6. 小心移取xx微升3号管稀释的标准液(Reagent F)到4号管,混匀

7. 将1至5号管放进冰槽里备用;标准管浓度见下表

管号

清理液(Reagent A)

标准液(Reagent F)

标准碘浓度

1

xx微升

xx微升

xx微克/升

2

xx微升

xx微升1号管

xx微克/升

3

xx微升

xx微升2号管

xx微克/升

4

xx微升

xx微升3号管

xx微克/升

5

xx微升

0

0

 

三、 标准曲线测定

1. 移取xx微升上述配制的标准液(Reagent F)到新的1.5毫升离心管

2. 加入xx微升处理液(Reagent C),混匀

3. 置于100℃温度下孵育60分钟(注意:避免液体蒸发干枯)

4. 置于室温下30分钟冷却

5. 再移取其中xx微升处理过的标准液(Reagent F)到一次性比色皿或96孔板的相应孔里

6. 加入xx微升反应液A(Reagent D)

7. 加入xx微升反应液B(Reagent E),混匀

8. 室温下孵育45分钟,避免光照

9. 即刻放进分光光度仪或酶标仪检测(波长405nm):获得吸光读数

10. 重复实验步骤1至9四次

11. 构建标准曲线:纵座标(Y轴)为吸光读数;横座标(X轴)为标准碘含量(微克/升)

 

四、 样品测定

1. 移取xx微升上述配制备的待测样品到新的1.5毫升离心管

2. 加入xx微升处理液(Reagent C),混匀

3. 置于100℃温度下孵育60分钟(注意:避免液体蒸发干枯)

4. 置于室温下30分钟冷却

5. 再移取其中50微升处理过的待测样品到一次性比色皿或96孔板的相应孔里

6. 加入xx微升反应液A(Reagent D)

7. 加入xx微升反应液B(Reagent E),混匀

8. 室温下孵育45分钟,避免光照

9. 即刻放进分光光度仪或酶标仪检测(波长405nm):获得样品吸光读数

10. 根据标准曲线获得样品对应碘含量(微克/升)

 

五、 含量计算

 

注意事项

1. 本产品为25次操作,包括标准样品

2. 操作时,须戴手套

3. 系统操作时,标准样品测定只需1次

4. 反应液A(Reagent D)和反应液B(Reagent E)具有毒性和腐蚀性,严格注意操作安全

5. 孵育时,避免光照

6. 通常碘含量表述为:微克/毫克蛋白;微克/毫升;微克/细胞总量

7. 本公司提供系列碘检测试剂产品

 

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测敏感

 

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

订购信息

单组分订购信息

编号                名称             规格

G&VS19073.1    细胞碘含量S-K比色法定量检测试剂盒     20次

G&VS19073.1A    清理液(Reagent A)             毫升

G&VS19073.1B    裂解液(Reagent B)             毫升

G&VS19073.1C    处理液(Reagent C)             毫升

G&VS19073.1D     反应液A(Reagent D)          毫升

G&VS19073.1E     反应液B(Reagent E)           毫升

G&VS19073.1F     标准液(Reagent F)             毫升

 

试剂盒订购信息

产品编号

名称

规格

G&VS19073.1

细胞碘含量S-K比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19073.2

组织碘含量S-K比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19073.3

体液碘含量S-K比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19073.4

食物碘含量S-K比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19073.5

盐碘含量S-K比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19073.6

乳制品碘含量S-K比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19073.7

植物碘含量S-K比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19073.8

水样品碘含量S-K比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19073,9

土壤碘含量S-K比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19316.1

细胞碘含量比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19316.2

组织碘含量比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19316.3

体液碘含量比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19316.4

食物碘含量比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19316.5

盐碘含量比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19316.6

乳制品碘含量比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19316.7

植物碘含量比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19316.8

水样品碘含量比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19316.9

土壤碘含量比色法定量检测试剂盒

20次

G&VS19317

碘含量高效液相法定量检测试剂盒

20次

 


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