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S2(Schneider2) 果蝇细胞

发布时间:2024/6/27 9:45:14      阅读次数:337

S2(Schneider2)  果蝇细胞

 

一、细胞基本属性

细胞货号

JW-SNL-558

细胞种属

果蝇

生长情况

半贴壁

培养条件

Grace's Insect Medium( Supplemented +10%FBS+1% P/S

培养环境

air, 100%28

二、细胞培养操作

换液周期

2-3 

培养基体积

T25  10-12ml 10cm  12-15ml

传代比例

1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

 

 

传代方法

1.  轻轻吸走培养上清 ,留 2-3ml 培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞;

2.  混匀细胞 ,收集细胞培养基 900rpm离心 3-5min ,弃上清;

3.  加新的完全培养基轻轻重悬细胞 ,均匀分到新的培养瓶里;

4.  补足完全培养基 ,将培养瓶放回培养箱静置培养;

 

注意事项

半贴壁细胞会附着瓶底 ,但贴壁不紧 ,轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱

 ,不需要胰酶消化。建议使用培养皿培养 ,更适合吹打细胞操作 ,吹打细胞注 意尽量轻柔 ,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、细胞冻存操作

冻存液配方

92%FBS+8%DMSO(新手推荐) 92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);

冻存规格

200-300 /ml  1ml 每管

 

 

冻存方法

1.   离心获得细胞沉淀后 ,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

2.  将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;

3.  将冻存管转入程序冻存盒 ,放入-80 度冰箱过夜 ,第二天转入液氮保存;  有程序冻存盒的实验室 ,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中 4 度静置 5- 10min ,再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜 ,第二天转入液氮保存

注意事项

冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查冻存活性 ,若有异常 ,及时调整实验方案

Tips:1.细胞圆形或多角形,贴壁或悬浮生长,传代时均可收集培养,换液时将悬浮细胞离心收 集后重新接回原瓶;

2.该细胞对胰酶比较敏感,胰酶消化后细胞形态会更多梭形,贴壁变紧,传代不建议使用胰酶消 化该细胞;

3.该细胞 28 度培养,建议 27.5-28 度之间,超过 28 度细胞状态会受损无法恢复,低于 27 度细 胞生长速度会变慢,但恢复温度后可以恢复生长;

4.该细胞低密度时生长很慢,注意控制传代密度不要过低;




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