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血清高密度脂蛋白(High density lipoprotein cholesterol , HDL-C)试剂盒说明书

发布时间:2024/7/4 8:55:33      阅读次数:6

血清高密度脂蛋白(High density lipoprotein cholesterol , HDL-C)试剂盒说明书
微量法  100 管/96 样 注意: 正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义
高密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成, 运载周围组织中的胆固醇, 再转化为胆汁 酸或直接通过胆汁从肠道排出,是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子, 俗称“血管清道夫”,对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。

测定原理
用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固醇,利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和 游离脂肪酸,从而把胆固醇酯转化为 FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化, 生成△4- 胆甾烯酮和 H2O2;再利用过氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚, 生成红色醌类化 合物; 在 500nm 有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品
离心机,恒温水浴锅、酶标仪/可见分光光度计、96 孔板/微量石英比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
试剂一:液体 20mL×1 瓶, 4℃保存。
试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1 瓶, -20℃保存。临用前加 5mL 试剂四充分溶解。
试剂四:液体 10mL×1 瓶, 4℃保存。
标准品:液体 1mL×1 支, 4℃保存。

样品处理
取血后 3 小时内分离血清,将血清样品与试剂一按照 1:1 的比例充分混匀,25℃静置 15min, 2000g 离心 15min,上清置于冰上待测。
测定操作表
                 标准管    测定管
标准品(μL)    4    
样本(μL)        4
试剂二(μL)    150    150
试剂三(μL)    50    50
混匀, 37℃静置 30min ,测定 500nm 处吸光值 A。分别记为 A 标准 管和 A 测定管

计算公式
HDL-C 含量(mmol/L)= A 测定管÷A 标准管×C 标准管
=5×A 测定管÷A 标准管
C 标准管: 5mmol/L

注意事项
1. 样本切勿反复冻融,最好在取血后 12 小时内完成测定。
2. 配置好的试剂三 4℃保存可半个月。
3. 线性范围为 0.15mmol/L-3.8mmol/L。


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