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巴斯德毕赤酵母Pichiapink-4菌种说明书

发布时间:2024/10/29 10:30:58      阅读次数:89

CAT#:JW-2-0155

低温运输,-80℃保存

产品及特点

本产品是巴斯德毕赤酵母Pichiapink-4菌种,是毕赤酵母Pink菌株,属于真核细胞。Pichiapink-4在缺乏腺嘌呤的培养基中无法生长,将含有ade2基因的表达质粒转化进入该菌株中后,能够使得菌株获得在腺嘌呤缺乏的培养基中生长,而且菌株颜色由ade2基因缺失时的粉红色恢复为白色。从而间接的指明那些克隆菌株转化质粒成功。本产品具有如下特点:

1. 可以通过颜色选择转化的菌落,转化的菌株会形成白色菌落。

2. 适宜的生长温度是24-30度,温度超过32度对于细胞内的蛋白表达是毁灭性灾难,可能导致细胞的死亡。

3. 可以在培养基中加入氨苄或卡那霉素的抗生素,来抑制细菌的污染和生长。

4. 菌株包含三个蛋白酶基因的敲除,分别是ade2、prb1、pep4。

5. 本产品只可用于科研。

基因型

巴斯德毕赤酵母Pichiapink-4菌种的基因型是:ade2、prb1、pep4。

巴斯德毕赤酵母Pichiapink-4菌株的基因型符号及其含义列表如下:

基因型符号

含义

ade2

PichiaPink-4 是ade2营养缺陷型酵母菌株,细胞内的ade2基因缺失,部分ade2启动子也缺失,所以菌株在缺乏腺嘌呤的培养基中无法生长。

prb1

PichiaPink-4 是prb1基因敲除酵母菌株。prb1 基因编码蛋白水解酶B,是细胞液泡内的丝氨酸蛋白酶,属于枯草杆菌蛋白酶家族。细胞内蛋白水解酶B的缺失可以保护表达产物免受降解,促进蛋白表达量的提高。

pep4

PichiaPink-4 是pep4基因敲除酵母菌株。pep4 基因编码蛋白水解酶 A,是细胞液泡内的天冬氨酸蛋白酶,能够自激活。

 

规格及成分

本产品使用塑料袋包装

成分

编号

规格

包装

巴斯德毕赤酵母Pichiapink-4菌

2-0155

1 mL

2.0 mL菌种管

使用手册

2-0155sc

1 份

 

原始文献

Cereghino JL, Cregg JM.甲基营养酵母巴斯德毕赤酵母中的异源蛋白表达FEMS Microbiol Rev. 2000 Jan;24(1):45-66.

运输及保存

低温运输,-80℃保种保存,有效期一年。

使用方法

按常规操作在固体培养皿上划线涂板,得到单克隆后再进行后续的感受态细胞制备和转化表达等操作,具体步骤请见分子克隆手册等工具书。

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