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巴斯德毕赤酵母GS115菌种说明书

发布时间：2024/10/29 10:33:09 阅读次数：116

CAT#:JW-2-0154

低温运输，-80℃保存

产品及特点

巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）又名法夫驹形氏酵母（Komagataella phaffi），其GS115菌种是一种毕赤酵母菌株，属于真核细胞，其基因型是His4，表型是Mut+。它有下列特点：

1. 最适生长温度是28至30℃，一般可以设置在30℃培养，不能超过32℃。

2. GS115毕赤酵母自身表型为Mut+，但是GS115转化株既能够产生出Mut+菌株，也能够产生出Muts菌株。目的蛋白在这两种转化株的表达水平可能是不同的，并且具有不可预测性，所以只有通过实验才能得到最好的酵母表达方案。

3. 为组氨酸缺陷型（His4基因型），故可以在YPD培养基中生长，或者在补充有组氨酸的基础培养基中生长，但是无法在单独的基础培养基中生长。如果表达载体上携带有组氨酸基因，可补偿宿主菌的组氨酸缺陷，可以在不含组氨酸的培养基上筛选转化子。

4. 对原核生物的抗生素如卡那霉素和氨苄青霉素抗性，因此可以培养基中加入一些氨苄青霉素和卡那霉素来抑制细菌的污染和生长。

5. 本菌种的组氨酸缺陷基因型可以自发突变为组氨酸野生型，突变概率一般低于10%。

6. 本产品是用30%的甘油与培养物混合而成。

7. 本产品只能用于科研。

规格及成分

本产品使用塑料袋包装

成分	编号	规格	包装
巴斯德毕赤酵母GS115菌种	2-0154	1 mL	2 mL菌种管
使用手册	2-0154sc	1份	无

运输及保存

低温运输，-80℃保存，有效期三年。

自备试剂

YPD培养基（分别含10 mg/mL氨苄青霉素和卡那霉素）

使用方法

菌种的复活：

1. 对-80℃保存的本产品

保存菌种复苏时，从冰箱中取出冻存菌种管，立即放置24-30℃水浴中快速复苏并适当快速摇动，直到内部结冰全部溶解为止，约需50-100秒。开启冻存菌种管，取100~200 mL巴斯德毕赤酵母GS115甘油菌菌液，接种至3~5 mL新鲜YPD培养基（分别含10 mg/mL氨苄青霉素和卡那霉素）中，过夜摇菌。

2. 对液氮保存的本产品

保存菌种复苏与-80℃冰箱冻结法保存菌种复苏相似，从液氮罐中取出冻存菌种管，应立即放置在24-30℃水浴中快速复苏并适当摇动，直到内部结冰全部溶解为止，一般约需50秒-100秒。开启冻存菌种管，取100~200 mL巴斯德毕赤酵母GS115甘油菌菌液，接种至3~5 mL新鲜YPD培养基（分别含10 mg/mL氨苄青霉素和卡那霉素）中，过夜摇菌。

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