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热门关键词：白介素 gibco ELISA试剂盒胎牛血清移液器 ※本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断 !

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冰冻切片组织β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒产品说明书

发布时间：2024/11/13 15:15:54 阅读次数：170

主要用途

冰冻切片组织β-半乳糖苷酶原位染色试剂是一种旨在以X-Gal为底物，通过切片组织内表达的外源性细菌β-半乳糖苷酶的催化生成深蓝色的沉积产物，从而在光学显微镜下观察到蓝色表达的细胞或组织，藉此建立一种简单的目测颜色来识别报告基因阳性细胞的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。广泛应用于基因组学、蛋白质组学和其它分子生物学研究。其适用于转基因后的人体和动物的冰冻组织切片。产品即到即用，性能稳定，参数优化，着色敏感。

技术背景

大肠杆菌的标志基因Lac Z编码β-半乳糖苷酶（ß-galactosidase；ß-gal），在其催化作用下，半乳糖可从乳糖的水解作用中得到。β-半乳糖苷酶非常稳定，对蛋白水解降解作用抗性强，且容易测试。因此β-半乳糖苷酶成为目前最常用的报告基因，以评价载体转染的效果。X-Gal （5-bromo-4-chloro-3-indoyl- ß-D-Galactopyranoside）是生物化学中常用的一种有机物，β- 半乳糖苷酶可以将X-Gal转化为蓝色的产物，由此用它作为生色底物，来建立一种简单的目测颜色来确定细胞β-半乳糖苷酶的活性，从而通过光学显微镜鉴别转染细胞报告基因的存在与否和强弱表现。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

固定液（Reagent B）毫升

稀释液（Reagent C）毫升

染色液（Reagent D）毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存染色液（Reagent D）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；稀释液（Reagent C）和染色液（Reagent D），用铝箔封裹，避免光照；有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于配制染色工作液

光学显微镜：观察染色后的组织细胞

实验步骤

实验开始前，将试剂盒里的染色液（Reagent D）从－20℃的冰箱里取出，置入冰槽里等待溶化。然后移取xx毫升稀释液（Reagent C）到15毫升锥形离心管，加入xx微升染色液（Reagent D），混匀后，置入37℃恒温水槽里预热，标记为染色工作液。然后进行下列操作：

1．准备10片待测的厚为10微米的冰冻切片

2．小心加上xx微升预冷的固着液（Reagent B），铺满整个样品表面

3．室温下孵育10分钟

4．小心移去切片上的固着液（Reagent B）

5．小心加上xx微升清理液（Reagent A），铺满整个切片表面

6．室温下，孵育5分钟

7．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

8．重复实验步骤5至7二次

9．小心加上xx微升预热的染色工作液，铺满整个切片表面

10．在37℃湿润的无CO2培养箱里，孵育16至24小时，保持湿润，避免干燥

11．小心移去切片上的染色工作液

12．小心加上xx微升清理液（Reagent A），铺满整个切片表面

13．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

14．（选择步骤）核固红复染：细胞核呈现粉红色（建议使用核固红复染试剂盒――G&VS40011）

15．放上盖玻片或封片

16．即刻在光学显微镜下观察和计数：表达β- 半乳糖苷酶活性的地方，呈现蓝色

注意事项

1．本产品为50次操作

2．操作时须戴手套

3．建议使用核内表达的载体代替胞内表达的载体转染或感染细胞或组织

4．本产品的参数：固着剂种类和浓度、pH、生色底物的选择和浓度等达到最优化

5． 染色工作液避免光照

6．用户根据实际需求，按比例配制试剂用量

7．染色时，培养箱为一般培养箱，没有二氧化碳，以防影响pH

8．染色过程，避免光照，切忌干燥

9．染色后的切片样品可以在4℃冰箱里长期保存，同样须避免光照

10．组织呈现蓝色的部位为酶活性的地方

11．本公司提供系列β-半乳糖苷酶检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定着色敏感

使用承诺

上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10010.3 冰冻切片组织β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 50次

G&VS10010.3A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10010.3B 固定液（Reagent B）毫升

G&VS10010.3C 稀释液（Reagent C）毫升

G&VS10010.3D 染色液（Reagent D）毫升

G&VS40011 核固红复染试剂盒 50次

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10010.1	细胞β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	100/250次
G&VS10010.2	全组织β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	10次
G&VS10010.3	冰冻切片β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	50次
G&VS10010.4	通用型组织/细胞β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	10/100次
G&VS10012.1	细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	100/250次
G&VS10012.2	全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	10次
G&VS10012.3	冰冻切片衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	50次
G&VS10012.4	通用型组织/细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒	10/100次
G&VS60003.1	细菌β－半乳糖苷酶活性原位染色试剂盒	40次
G&VS60003.2	细菌β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂盒	20次
G&VS60003.3	细菌β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS60003.4	细菌β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10037.1	动物细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂盒	20次
G&VS10037.2	动物细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10037.3	动物组织β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS60013.1	真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂盒	20次
G&VS60013.2	真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS60013.3	真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS60013.4	真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性滤膜染色试剂盒	20次
G&VS10060.1	动物细胞β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒	20次
G&VS10060.2	动物组织β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒	20次