您好,欢迎光临上海极威生物科技商城!

人1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)ELISA检测试剂盒的用途说明

发布时间:2021/6/28 11:20:24      阅读次数:618

 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断

1,25-二羟基维生素D31,25(OH)2D3ELISA检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA).往预先包被1,25-二羟基维生素D31,25(OH)2D3)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本 标准品 HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤.用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的1,25-二羟基维生素D31,25(OH)2D3)呈正相关.用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度.

样品收集 处理及保存方法

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离.

2.  血浆:EDTA 柠檬酸盐或肝素抗凝.3000转离心30分钟取上清.

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物.

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎.3000转离心10分钟取上清.

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻.

自备物品

1. 酶标仪(450nm)

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL 2-20uL 20-200uL 200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟.从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用.

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存.

3.  预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可.

4.  严格按照说明书中标明的时间 加液量及顺序进行温育操作.

5.  所有液体组分使用前充分摇匀.

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

标准品

0.3mL

0.3mL

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

注:标准品浓度依次为:48 24 12 6 3 0 ng/mL.

试剂的准备

 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水.

洗板方法

1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次.

2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次.

操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃.

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;

4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min.

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板).

6.  每孔加入底物A B各50μL,37℃避光孵育15min.

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值.

 

 

尊敬的客户:

您好!上海极威生物科技有限公司(Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.)成立于上海,是一家专业从事“产品研发 市场销售 技术服务”为一体的高科技生物技术公司.极威生物依托国内外技术研发人才的优势,由留美资深科学家与数位国内多年从事生物领域研究的博士 硕士等高校生物领域研究人员共同创立,在科学研究和医疗检测领域享有极高的声誉,经过年的努力发展已成为专业供应各类生物科研用品的公司,长期专注于生物领域,旗下产品种类众多.极威生物秉承以产品质量为根本,以市场需求为导向,以为客户创造价值为己任的精神,致力于发展中国的科研事业.力求为我国生物科技事业提供更好的 更专业性的技术服务和科研产品.自公司成立以来,公司的销售额保持高速增长,企业规模不断扩大,研发产品包括elisa试剂盒,生化试剂盒,动物血制品,抗体,标准品,生化试剂,实验耗材等10万余种类,公司长期致力于elisa试剂盒 生化试剂盒的研发,为客户提供生化试剂盒 ELISA试剂盒 技术服务等一系列实验代测服务.

 

   实验代做服务:酶联免疫ELISA 生化测试 液相气相检测 Icp-MS测试 载体构建 RACE 全基因合成 线粒体测序 荧光定量PCR 基因克隆 定点突变 染色体步移 基因组全序列获取 环境微生物多样性 微生物基因组测序 微生物菌种鉴定 甲基化分析服务,公司本着“质量第一,专业服务”的原则,致力于为用户提供高性价比的试剂盒和检测服务.


微信客服,扫一扫立即咨询


微信客服,扫一扫立即咨询

首页|技术服务|品牌中心|新闻中心|公司介绍|联系我们


微信客服
扫一扫立即咨询


微信客服
扫一扫立即咨询

销售电话:

021-80186165

16602115336

15214379366

13148176757