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发布时间：2025/3/27 14:37:03 阅读次数：34
今天有客户咨询到上海极威生物科技有限公司的生物样品乙酸激酶法定量检测试剂盒产品,咨询到该产品的使用用途,我们的产品仅供科研实验使用,还有,具体的产品说明书可以咨询销售.
生物样品乙酸激酶法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
生物样品乙酸激酶法定量检测试剂是一种旨在通过乙酸激酶 丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环反应系统 中,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化反应后吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样 品中乙酸含量的权威而经典的技术方法.该技术经过精心研制 成功实验证明的.其适用于各种生物样品, 包括动物 人体 酵母 细菌等裂解或培养上清乙酸含量的检测.产品严格无菌,即到即用,操作简捷, 性能稳定.
技术背景
乙酸（CH3COOH）是国际纯粹（理论）与应用化学联合会（IUPAC）建议名称,在化学命名法中的系统称 谓是乙醇酸,中文称之为醋酸,而无水纯乙酸则称为冰乙酸.乙酸是一种最简单的弱性有机羧酸和典型的 脂肪酸,普遍存在于各种食品 饮料,甚至纸业 药业和工业材料中.在啤酒和葡萄酒等酒类饮料加工中, 乙醇发酵或苹果酸/乳酸发酵过程会产生少量乙酸.作为挥发性酸度（VA）的标准指数,乙酸浓度已成为评 价葡萄酒质量的重要指标之一.在碳酸饮料 醋酸饮料和咖啡饮料中,乙酸作为添加剂,起到防腐和调节 酸度的作用.联合国食品和农业组织与世界卫生组织制定的食品添加剂通用标准（GSFA）中规定,在牛奶 咖啡 茶 麦茶等饮料中,可以按照良好食品生产规范（GMP）的要求添加乙酸.而在果汁饮料中,乙酸 非自然存在,也不允许添加,所以如有乙酸存在,则表明果汁或水果原料已经腐败.采用有效的检测方 法是防止发生乙酸中毒事件的重要手段之一 .基于底物乙酸 ,在 ATP 存在的条件下,通过乙酸激酶 （acetate kinase）的催化,转化为乙酰磷酸（acetyl-phosphate 和二磷酸腺苷（ADP）；进而通过丙酮酸激酶 （pyruvate kinase；PK）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase；LDH）反应系统中,还原型烟酰胺腺嘌呤二 核苷酸（ reduced nicotinamide adenine dinucleotide ；NADH ） 转化 为 氧 化 型 烟 酰胺 腺 嘌 呤 二 核苷 酸 （nicotinamide adenine dinucleotide；NAD）,其吸光峰值的变化（340nm）,来定量分析乙酸的含量.其反 应方式为：
| 产品内容 |
|
| 裂解液（Reagent A） | 毫升 |
| 缓冲液（Reagent B） | 毫升 |
| 酶促液（Reagent C） | 微升 |
| 反应液（Reagent D） | 微升 |
| 底物液（Reagent E） | 微升 |
| 阴性液（Reagent F） | 微升 |
| 产品说明书 | 1 份 |
| 保存方式 |
|
保存在－20℃冰箱里；底物液（Reagent E）避免光照；有效保证 6 月
用户自备
1.5 毫升离心管：用于样品制备的容器 微型台式离心机：用于样品操作
比色皿或酶标板：用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪：用于比色分析
实验步骤
一 样品准备 （注意：参见注意事项7 和8）
选择一：培养细胞或细菌
1 ． 准备好 1 毫升待测细胞或细菌
2 ． 转移到到 1.5 毫升离心管
3 ． 放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟,速度为 1000g
4 ． 小心抽去上清液
5 ． 加入 xx 微升裂解液（Reagent A）
6 ． 涡旋震荡 15 秒
7 ． 置于冰槽里孵育30 分钟
8 ． 放进 4℃微型台式离心机离心 15 分钟,速度为 10000g
9 ． 小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心管
10 ．移取 10 微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）
11．即刻置于冰槽里备用或放进－20℃冰箱里保存
选择二：细胞或细菌培养液上清等
1 ． 移取 1 毫升细胞或细菌培养液到 1.5 毫升离心管
2 ． 放进微型台式离心机离心 5 分钟,速度为 16000g（或 13000RPM ,例如 eppendorf 5415）
3 ． 小心移取 100 微升上清液到新的预冷的 1.5 毫升离心管
4 ． 即刻置于冰槽里备用或放进－20℃冰箱里保存
二 测定准备
1. 开启并设定好分光光度仪（温度为25℃)：波长 340nm
2. 从－20℃冰箱里取出试剂,置于冰槽里融化；底物液（Reagent E）避免光照
3. 缓冲液（Reagent B）室温下均衡温度
三 背景对照测定
1 ． 移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到新的比色皿
2 ． 加入 xx 微升酶促液（Reagent C）
3 ． 加入 xx 微升反应液（Reagent D）
4 ． 加入 xx 微升底物液（Reagent E）
5 ． 加入 xx 微升阴性液（Reagent F）
6 ． 上下倾倒数次,混匀
7 ． 在 25℃温度下孵育 10 分钟
8 ． 即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照
四 样品测定
1 ． 移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到新的比色皿
2 ． 加入 xx 微升酶促液（Reagent C）
3 ． 加入 xx 微升反应液（Reagent D）
4 ． 加入 xx 微升底物液（Reagent E）
5 ． 加入 10 微升待测样品（50 微克蛋白）（注意：样品须清澈）
6 ． 上下倾倒数次,混匀
7 ． 在 25℃温度下孵育 10 分钟
8 ． 即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数
五 计算样品活性
六 酶标板测定
1 ． 在 96 孔酶标板上做好相应标记：背景对照和样品
2 ． 分别移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到 96 孔板中的所有孔里
3 ． 分别加入 xx 微升酶促液（Reagent C）
4 ． 分别加入 xx 微升反应液（Reagent D）
5 ． 分别加入 xx 微升底物液（Reagent E）
6 ． 分别加入 10 微升阴性液（Reagent F）或待测样品到相应孔中（注意：样品须清澈）
7 ． 轻轻摇动酶标板
8 ． 在 25℃温度下孵育 10 分钟
9 ． 即刻放进酶标仪检测
10 ．活性计算
注意事项
1 ． 本产品为 20 次操作,包括背景对照
2 ． 本产品检测敏感度为 2 微摩尔/升（0. 12 毫克/升）
3 ． 操作时,须戴手套
4 ． 系统操作过程中,背景测定只需 1 次
5 ． 样品须澄清,至关重要
6 ． 乙酸是一种挥发性物质,因此样品处理时,不应该加热 干燥 暴露于空气中等,如果无法避免,可 使用氢氧化钠调整 pH ,使其转化为乙酸盐
7 ． 如果样品中存在高浓度的蛋白 脂肪酸 酚类等物质,建议进行样品预处理（去色 去脂 去蛋白 去气体等）；本公司提供乙酸待测样品处理试剂盒－G&VS19002. 11
8 ． 比色测定后,比色皿须清洗彻底
9 ． 测定值由高到低变化,表明样品乙酸阳性
10 ．反应 10 分钟后比色测定值趋于稳定；如果仍有波动,建议适当延长检测时间,直至读数稳定
11．如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
12 ．本公司提供系列乙酸检测试剂产品
质量标准
1 ． 本产品经鉴定性能稳定
2 ． 本产品经鉴定检测敏感
使用承诺
极威生物秉着“信誉至上 客户满意 质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务.用户收到货后, 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用.我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证 说明书所述的使用效果.在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式（实验报告） 与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品.如系使用者错误操作 所致,本公司不承担由此造成的损失.
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK , RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG.
订购信息
| 单组分订购信息 |
编号 名称 规格
G&VS19003.10 生物样品乙酸激酶法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19003. 10A 裂解液（Reagent A） 毫升
G&VS19003. 10B 缓冲液（Reagent B） 毫升
G&VS19003. 10C 酶促液（Reagent C） 毫升
G&VS19003. 10D 反应液（Reagent D） 毫升
G&VS19003. 10E 底物液（Reagent E） 毫升
G&VS19003. 10F 阴性液（Reagent F）毫升
| 试剂盒订购信息 |
| 产品编号 | 名称 | 规格 |
| G&VS19002. 11 | 乙酸待测样品处理试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003. 1 | 酒类乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003.2 | 饮料乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003.3 | 调料乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003.4 | 烘赔食品乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003.5 | 乳品乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003.6 | 蔬菜乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003.7 | 肉类乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003.8 | 药品乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003.9 | 饲料乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
| G&VS19003.10 | 生物样品乙酸激酶法定量检测试剂盒 | 20 次 |
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