当前位置：首页>新闻中心
发布时间：2025/3/28 11:44:31 阅读次数：34
微量法
甘油三酯（TG） 含量检测试剂盒说明书
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定.
货号：JW-W-B408 规格：100T/96S
产品内容：
试剂一： 自备,取玻璃空瓶,加入 60mL 正庚烷,60mL 异丙醇,盖紧后混匀,4℃保存. 试剂二：液体 3mL×1 瓶,4℃保存.
试剂三：液体 10mL×1 瓶,4℃保存.
试剂四：液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存. 试剂五：液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存. 试剂六：液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存.
标准品：粉剂×1瓶,临用前加 5mL 试剂一,即 1mg/mL 甘油三酯标准溶液,4℃保存. 产品说明：
TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物. 测 定原理： 用异丙醇抽提取 TG,KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛, 在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,在 420 nm 有特征吸收峰,其颜色的深浅与 TG 含 量成正比.
自备仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪 微量比色皿/96 孔板 水浴锅 可调式移液枪 双蒸水 125mL 玻璃 空瓶.
操作步骤:
一 TG 的提取：
1 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~ 10的比例（建议称取约0. 1g组织,加入1mL 试剂一）进行冰浴匀浆,8000g ,4℃离心10min ,取上清待测.
2 细胞 细菌：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加 1mL 试剂一,超声波破碎 1min（强度 20％,超声 2s,停 1s）,8000g , 4℃离心 10min ,取上清待测.
3 血清（浆）等液体样品：直接测定.
二 测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30min ,调节波长到 420 nm ,蒸馏水调零.
2. 水浴锅预热到 65℃.
|
| 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| 双蒸水 (µL） | 40 |
|
|
| 标准液 (µL） |
| 40 |
|
| TG 待测液 (µL） |
|
| 40 |
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床 诊断 食品 化妆品检测等用途！
| 试剂一 (µL） | 125 | 125 | 125 |
| 试剂二 (µL） | 25 | 25 | 25 |
加试剂一后充分混匀,再加试剂二,剧烈振荡 30s ,静置,待分层后取上层溶液 15µL ,置于新 的 EP 管中.
3. 甘油三酯含量测定：
|
| 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| 上层溶液 (µL） | 15 | 15 | 15 |
| 试剂三 (µL） | 50 | 50 | 50 |
| 试剂四 (µL） | 15 | 15 | 15 |
| 充分混匀,65℃水浴 3min | |||
| 试剂五 (µL） | 50 | 50 | 50 |
| 试剂六 (µL） | 50 | 50 | 50 |
| 充分混匀,65℃水浴 15min | |||
转移至微量比色皿/96 孔板测定 420nm 处吸光度,记为 A 空,A 标和 A 测.注 意：空白管和标准管只需测定一次.
三 计算公式：
1. 血清（浆）中甘油三酯含量：
TG 含量（mg/dL）=C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空） =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）
C 标准品：1mg/mL；100：单位换算系数,1dL= 100 mL.
2. 组织中甘油三酯含量：
(1) 按样本蛋白浓度计算
TG 含量（mg/ mg prot）= C 标准品×V×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷（Cpr×V） =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷ Cpr
(2) 按样本鲜重计算
TG 含量（mg/ g 鲜重）=C 标准品×V×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷W =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷ W
C 标准品：1mg/mL ；Cpr：样本蛋白浓度,mg/mL；W：样本鲜重,g；V：加入试剂一的体积, 1mL.
3. 细胞 细菌中甘油三酯含量：
TG 含量（mg/104 cell）=C 标准品×（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷细菌或细胞密度 =（A 测－A 空）÷（A 标－A 空）÷细菌或细胞密度
C 标准品：1mg/mL；细菌或细胞密度：104 cell /mL. 注意事项：
1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧.
2. 加试剂二后需剧烈震荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取.
3. 最低检出限为 100µ mol/L.
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床 诊断 食品 化妆品检测等用途！
上海极威生物科技有限公司 公司地址:上海市崇明县长兴镇潘园公路1800号2号楼9703室
邮箱：435399850@qq.com 电话：021-80186165 手机：16602115336
备案号：沪ICP备15046135号-4
