关于商城

商城指南

支付方式

配送方式

售后服务

关于细胞处理的相关步骤

发布时间：2026/4/17 14:09:54 阅读次数：99

1. 复苏细胞：从液氮灌中或-80℃冰箱中查找到需要复苏的细胞,水浴锅提前打开预热 37℃.
1) 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2) 加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀.
3) 弃去上清液,完全培养基重悬细胞.然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基接种于 T25 培养瓶中（或 6cm 皿中）,
培养过夜,第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度.

2. 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养.
1) 弃去培养上清,用不含钙镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次；
2) 加 1-2mL 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中,置于 37℃培养箱中消化 2-3min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后,加 5ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化；
3) 轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,1000rpm离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基后吹匀；
4) 按 5-6mL/瓶补加完全培养基,将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 6-8mL完全培养基的培养皿或者培养瓶中.~
（即 1 个 T25 传代接种至 2 3 个 T25 或者 2 3 个直径为 6cm 的培养皿）

3. 细胞冻存：
1）细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球数板计数,来决定细胞的冻存密度.一般细胞的推荐冻存密度为1× 10^6 1×107个活细胞/ml.
2）1000rpm离心3-5mn,去掉上清.用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1× 10^6 1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称代数日期等信息.
3）按冻存数量加入无血清冻存液后直接放-80℃冰箱过夜,后续可转入液氮罐中长期保存.