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关于常温细胞收货当天处理方式

发布时间：2026/4/17 14:12:46 阅读次数：110

常温细胞收货当天处理方式
1. 收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象.
2. 镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象, 方便后续售后处理.
3. 消毒后,更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时.如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集重新接种止培养瓶.
4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定),首次传代推荐比例 1：2 到 1：3（按实际收货细胞密度决定,若不确定可联系技术支持）；若细胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖；悬浮细胞注意离心所有培养基以收集细胞.
5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代（参考附件）,或及时联系技术支持进行指导传代.

贴壁细胞传代：
1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃；
2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的胰酶；胰酶量应足以覆盖细胞层(T25为1ml)；
4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟（请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异）；
5.在显微镜下观察细胞解离情况；如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒钟检查一次解离情况；
6.细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽；加入所用解离剂两倍体积的预热完全生长培养基；吹打细胞层表面数次,使培养基分散；
7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟（请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异）；
8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱（注：如果使用培养瓶,将其放入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖）.

悬浮细胞传代：
1.将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min,收集上清,加 1- 2ml 完全培养基重悬,按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中,补充5-8ml/瓶新的完全培养基 ,最后放入细胞培养箱中培养.