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英文名称:Rabbit β2-GP1 Ab IgG (β2-Glycoprotein 1 Antibody IgG) ELISA Kit
中文名称:兔β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)酶联免疫吸附测定试剂盒
其他名称:兔β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)elisa试剂盒
别 名:兔β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA试剂盒
产品类型:兔Elisa试剂盒
货 号:GV-E18644
规 格:96T
保存温度:2-8℃
方 法 学:酶联免疫法
计量单位:盒
保 质 期:6个月
是否提供代测:是
是否提供试用:否
检测目的:科研实验研究,不用于临床诊断
检测样本:血清/血浆/细胞上清液/组织匀浆等
兔β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)Elisa试剂盒试验所需自备试验器材 (不提供,但可协助购买)
1、酶标仪(450nm波长滤光片)
2、进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10ul, 2-20ul, 20-200ul, 200-1000ul。
3、37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。可协助代购相关产品,请咨询。
兔β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)elisa试剂盒注意事项
1、试剂盒使用前请保存在2-8 ℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2、浓缩生物素化抗体,浓缩酶结合物体积小,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000 转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。取用前, 请用移液器小心吹打4-5次使溶液混匀。
3、从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶完全溶解后再配制洗涤液。(加热温度不要超过50 ℃) 使用时洗涤液应为室温。
4、不同批号的试剂盒组份不能混用(洗涤液和反应终止液除外)。请提前咨询上海极威生物科技有限公司。
5、充分轻微混匀对反应结果尤为重要,最好使用微量振荡器(使用最低频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻敲击酶标板框混匀。
6、在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7、试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。
8、试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。
9、如果分次使用,请根据需要量配制各组分,以免配制过多造成浪费而影响后续试验。剩余板孔请用封板胶纸封住,放回铝箔袋中,2 个月内用完。
Elisa试剂盒洗板方法
1、手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2、自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
兔β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)elisa试剂盒操作步骤
1、从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3、待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4、随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
Elisa实验结果计算
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
Elisa试剂盒免责声明
1、试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2、严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
Elisa试剂盒实验常见问题分析:
问题一:高背景或阴性对照值偏高
可能原因 | 建议 |
阴性对照孔被阳性对照或样品污染 | 洗涤时,勿将洗液溢出孔外。 |
洗涤不充分 | 确保在洗涤时每个孔都充满了液体,确保将残余液体从孔中移除。 |
酶结合物过浓 | 请检查酶结合物是否按说明书规定稀释 |
孵育温度过高 | 检查孵育箱的温度是否正确、稳定 |
底物在使用前曝光 | 应保存在暗处,避光。 |
读板前停留时间过长 | 加终止液后 3 分钟内读数 |
问题二:阳性对照值偏低或低吸光度
可能原因 | 建议 |
试剂未平衡至室温 | 开始实验前,将试剂盒平衡至室温 |
包袋中有湿气 | 首次开袋标上日期,封好未使用的孔条, 放入干燥剂。 |
样本中有抑制剂 | 叠氮化钠抑制HRP 的活性 |
试剂在使用前未混匀 | 使用前混匀试剂 |
洗涤步骤过于剧烈 | 降低洗涤系统的压力 |
实验开始后,微孔变干燥 | 实验过程勿中断,应连续完成所有的实验步骤。 |
检测体积偏小 | 确保移液器已校正 |
问题三:边缘效应
可能原因 | 建议 |
蒸发 | 各步之间,须使用封版胶密封反应板。 |
温度不均匀 | 校准孵育箱,勿叠放反应板。 |
问题四:标准曲线不佳
可能原因 | 建议 |
倍比稀释标准品时未混匀 | 稀释标准品的每一步均需混匀 |
过早稀释 | 标准品在快要使用时稀释 |
加入的体积不正确 | 使用校准过的移液器,快速、等量的将标准品分配到各个微孔中。 |
问题五:标准曲线良好,但样本无检测信号
可能原因 | 建议 |
样本中无检测物或检测物含量极低 | 设置内参,重新实验 |
样本中其他物质影响/ 掩盖检测 | 作适当稀释,降低其他物质的干扰,或作系列稀释,检测回收率。 |
样本中检测物浓度过高,Hook 效应导致假低值 | 适当倍数稀释样本,检测物浓度尽量在试剂盒检测范围内。 |
问题六:重复性较差
可能原因 | 建议 |
微孔中有气泡 | 用针尖挑破气泡 |
试剂未混匀 | 确保充分混匀试剂 |
样本中有杂质或沉淀物 | 使用前离心 |
微孔包被面被吸头划破 | 加液时小心操作 |
使用用过的封板胶纸 | 每次须使用新的封板胶封住反应孔 |